STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff SMADi Neural Induction Kit
- 研究用
STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitは、ヒトES/iPS細胞(hPSC)を高効率に神経誘導する培地キットです。組成の明確な無血清培地、およびサプリメントから構成されています。
本品は、STEMdiff™ Neural Induction Medium(ST-05835)に、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Supplementを組み合わせたもので、TGF-β/BMP依存性SMADシグナル伝達の阻害によって分化を誘導します。その結果、分化困難な細胞株でさえも効率的に神経誘導することができます。
胚様体(EB)または単層培養のプロトコールで神経前駆細胞(NPC)を作製できます。得られる培養物には、SOX1、Nestin、PAX6を発現する中枢神経系(CNS)型NPCが豊富に含まれます。
本品で作製したNPCをシングルセルとして継代し、STEMdiff™ Neural Progenitor Medium(ST-05833)で増殖させることができます。NPCはまた、ニューロンとグリアに分化させることもできます。
製品の特長
STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitをもちいて、hPSCから高効率に神経誘導できます
- 組成が明確な無血清培地です
- hPSCからCNS型NPCへの効率的な変換を促進し、非CNS細胞型への不要な分化を抑制します
- 分化が困難なhPSC株でさえ効率的に神経誘導できます
- ニューロンとグリアへの下流分化の効率を改善します
- 胚様体(EB)と単層培養(モノレイヤー)、両方の神経誘導プロトコルに対応しています
- 各種TeSR™培地で維持された細胞株から再現性良く分化できます
- 便利で使用しやすいフォーマットとプロトコルです
データ紹介
PAX6とSOX1を高発現する神経前駆細胞(NPC)の生成を促進します
mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養したhPSCから、STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitを使用して、胚様体または単層プロトコルによりNPCを生成できます。生じるNPCは、CNSタイプのNPCマーカーPAX6およびSOX1を発現します。

複数のhPSC株にわたってNPCを安定して生成できます
複数のヒトES/iPS系統(mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養)を単層プロトコルで神経誘導しました。培養7日後に細胞を回収し、PAX6、SOX1およびSOX10抗体による免疫染色を行いました。培養ウェル全体にわたって陽性核をカウントするハイコンテンツイメージャーImageXpress Microを使用して、画像化および定量化しました(細胞株ごとにn = 3の複製)。
データは、STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitを使用して作製した神経前駆細胞が非常に高レベルのCNSタイプマーカーPAX6とSOX1を発現し、神経堤マーカーSOX10は低レベル~検出不能であることを示しました。

ニューロンとアストロサイトへの下流分化効率が高いNPCを生成します
mTeSR™1で維持されたhPSCから、胚様体(EB)プロトコルで誘導した神経前駆細胞を、STEMdiff™ Neuron Differentiation / Maturation Kit、STEMdiff™ Astrocyte Differentiation / Maturation Kit、およびSTEMdiff™ Dopaminergic Neuron Differentiation / Maturation Kitを使用してさらに分化させました。

mTeSR™ Plusで維持培養したhPSCからもNPCを生成できます
ヒトES細胞(H9)および iPS 細胞(STiPS-M001)を(A)培地交換を毎日実施した mTeSR™1 または(B)培地交換を制限した mTeSR™ Plusで維持培養した後、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitをもちいた胚様体 (EB) 形成のプロトコルで神経前駆細胞へ分化させました。mTeSR™1 または mTeSR™ Plusで維持培養したhPSC由来の神経前駆細胞は、EBを再播種した後に神経ロゼット(矢印)を明瞭に形成します。
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