STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff SMADi Neural Induction Kit

研究用

STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitは、ヒトES/iPS細胞（hPSC）から高効率に神経誘導する培地キットです。組成の明確な無血清培地、サプリメントで構成されています。

本品は、STEMdiff™ Neural Induction Medium（ST-05835）と、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Supplementを組み合わせたキットで、TGF-β/BMP依存性のSMADシグナル伝達を阻害して分化を誘導します。その結果、分化困難だった細胞株でさえ効率的に神経誘導できます。
胚様体（Embryoid body；EB）または単層培養のプロトコルで神経前駆細胞（neural progenitor cell；NPC）を作製できます。得られる培養物には、SOX1、Nestin、PAX6を発現する中枢神経系（central nervous system；CNS）型のNPCが豊富に含まれます。

本品で作製したNPCをシングルセルとして継代し、STEMdiff™ Neural Progenitor Medium（ST-05833）で増殖させることができます。NPCはまた、ニューロンとグリアに分化させることもできます。

2018/05/14 12:00の製品情報

本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitで、hPSCから効率良く神経誘導

組成が明確な無血清培地
hPSCからCNS型の神経前駆細胞（NPC）へ転換を促し、非CNS型細胞への分化は抑制
分化困難だったhPSC株でさえ高効率に神経誘導
ニューロンとグリアに下流分化する効率を改善
胚様体（EB）と単層培養（モノレイヤー）、両方の神経誘導プロトコルに対応
各種のTeSR™培地で維持したhPSC株から再現性良く分化
便利で使用しやすい製品仕様とプロトコル

データ紹介

PAX6とSOX1を高発現する神経前駆細胞（NPC）の作製をサポート

mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養したhPSCから、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitを使用して、胚様体または単層プロトコルによりNPCを誘導できます。生じるNPCは、CNS型NPCマーカーであるPAX6とSOX1を発現します。

さまざまなhPSC株からNPCを安定して作製

複数のヒトES/iPS細胞株（mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養）から単層培養プロトコルで神経誘導し、培養開始から7日後に細胞を回収しPAX6、SOX1およびSOX10抗体で免疫染色しました。ハイコンテンツイメージャー ImageXpress Microにより培養ウェル全体の陽性核をカウントし、画像化および定量化しました（細胞株ごとにn = 3の複製）。
STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitで作製したNPCはCNS型マーカーのPAX6とSOX1を非常に高レベルに発現する一方、神経堤マーカーのSOX10は低～非検出レベルの発現にとどまることが示されました。

ニューロンとアストロサイトへ高効率で分化できるNPCを取得

mTeSR™1で維持されたhPSCから胚様体（EB）プロトコルでNPCに誘導しました（左）。これをさらに、STEMdiff™ Neuron Differentiation / Maturation Kit、STEMdiff™ Astrocyte Differentiation / Maturation Kit、およびSTEMdiff™ Dopaminergic Neuron Differentiation / Maturation Kitと各製品のプロトコルを用いて前脳ニューロン、アストロサイト、およびドーパミン作動性ニューロンにそれぞれ分化させました。

mTeSR™ Plusで維持したhPSCからのNPC作製

ヒトES細胞（H9株）および iPS細胞（STiPS-M001株）を（A）mTeSR™1（培地交換を毎日実施）または（B）mTeSR™ Plus（培地交換をより低頻度で実施）で維持培養した後、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kit をもちいた胚様体（EB）プロトコルでNPCを誘導しました。
mTeSR™1とmTeSR™ Plusの両培地で維持培養したhPSC由来のNPCはともに、EB再播種後に神経ロゼット（矢印）を明瞭に形成します。

製品記事

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