STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff SMADi Neural Induction Kit

  • 研究用

STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitは、ヒトES/iPS細胞の非常に効率的な神経誘導のための、definedな組成の無血清培地およびサプリメントで構成されています。このキットは、STEMdiff™ Neural Induction Medium（ST-05835）とSTEMdiff™ SMADi Neural Induction Supplementを組み合わせたもので、TGF-β/BMP依存性のSMADシグナル伝達を阻害することで分化を誘導します。その結果、分化しにくい細胞株でさえも効率的に神経誘導することができます。神経前駆細胞（NPC）は、STEMdiff™ SMADi Neural Induction Kitを用いて、胚様体（EB）プロトコールまたは単層培養プロトコールで作製できます。得られる培養物には、SOX1、Nestin、PAX6を発現する中枢神経系（CNS）型NPCが豊富に含まれます。作製したNPCは、シングルセルとして継代し、STEMdiff™ Neural Progenitor Medium（ST-05833）で増殖させることができます。NPCはまた、STEMdiff™ Neuron Differentiation Kit（ST-08500）、STEMdiff™ Dopaminergic Neuron Differentiation Kit (ST-08520)、STEMdiff™ Astrocyte Differentiation Kit (ST-08540)を使用して、ニューロンとグリアに分化させることもできます。

2018/05/14 12:00の製品情報

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本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

特長

  • 無血清でdefinedな組成
  • ES/iPS細胞からCNSタイプ神経前駆細胞への効率的な変換を促進し、非CNS細胞タイプの不要な分化を抑制
  • 分化が困難なES/iPS細胞株でさえ効率的に神経誘導
  • ニューロンとグリアへの下流分化の効率を改善
  • 胚様体（EB）と単層培養、両方の神経誘導プロトコルに対応
  • TeSR™シリーズの維持培地で培養した細胞株を再現性良く分化
  • 便利で使いやすいフォーマットとプロトコル

データ

PAX6とSOX1を高発現する神経前駆細胞（NPC）の生成を促進

mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養したhPSCから、STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitを使用して、胚様体または単層プロトコルによりNPCを生成できます。生じるNPCは、CNSタイプのNPCマーカーPAX6およびSOX1を発現します。

複数のhPSC株にわたって堅牢に神経前駆細胞を生成

複数のヒトES/iPS系統（mTeSR™1またはTeSR™-E8™で培養）を単層プロトコルで神経誘導しました。培養7日後に細胞を回収し、PAX6、SOX1およびSOX10抗体による免疫染色を行いました。培養ウェル全体にわたって陽性核をカウントするハイコンテンツイメージャーImageXpress Microを使用して、画像化および定量化しました（細胞株ごとにn = 3の複製）。

データは、STEMdiff™SMADi Neural Induction Kitを使用して作成された神経前駆細胞が非常に高レベルのCNSタイプマーカーPAX6とSOX1を発現し、神経堤マーカーSOX10は低レベル～検出不能であることを示しました。

生成された神経前駆細胞は、ニューロンとアストロサイトへの下流分化効率が高い

mTeSR™1で維持されたhPSCから、胚様体（EB）プロトコルで誘導した神経前駆細胞を、STEMdiff™ Neuron Differentiation / Maturation Kit、STEMdiff™ Astrocyte Differentiation / Maturation Kit、およびSTEMdiff™ Dopaminergic Neuron Differentiation / Maturation Kitを使用してさらに分化させました。

関連リンク

技術資料

アプリケーションノート

資料動画

製品添付文書

製品関連文献

よくある質問

STEMdiff Neuralはガラス底で使用できますか？

本製品のガラス底96ウェルプレートでの使用につきまして、STEMCELL Technologies社では評価しておりませんが、poly-L-ornithine (for neurons) およびMatrigel hESC-qualified Matrix (for astrocytes)でプレートをコーティングできれば、お試しいただけると考えております。
ガラス面への細胞接着が上手くいくかどうかは、ガラスの種類、ラミニンの濃度、poly-L-ornithineを希釈するバッファーなど、いくつかの因子に依存します。
STEMCELL Technologies社のプロトコールを元に、ガラスに最適な条件をまずはご検討ください。

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STEMdiff APEL2 MediumでヒトiPS細胞から血球分化する際に、PFHMの添加が必要ですか？

ヒトiPS細胞からの血球分化の際には5% PFHM (Gibco® PFHM-II, Thermo Fisher Catalog #12040077)の添加が必要な可能性が高いです。
ただし、予め条件検討をお願いいたします。
添加する場合は5 mLのPFHMを100 mLのAPEL2に加えてください。

※ ヒトiPS細胞から造血前駆細胞へ分化させる培地「STEMdiff Hematopoietic Progenitor」（製品コード：ST-05310）もございますのであわせてご検討ください。

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