製品の特長

STEMdiff Neural Crest Differentiation Kitをもちいて、hPSC由来神経堤細胞を効率よく取得できます

• 迅速 ― 簡便な単層プロトコルを用いて、わずか6日間で神経堤細胞（NCC）を形成します
• 効率的 ― 多能性NCCを純度 > 70％で形成します（※）
• 多能性 ― 末梢ニューロン、軟骨細胞、骨芽細胞などの下流派生物へ分化可能なNCCを得ることができます
• 汎用性 ― mTeSR™1、mTeSR™ Plus、またはTeSR™-E8™で維持されているhPSCからの培養に適しています

※　SOX10⁺神経堤細胞が70％以上（同時にCD271⁺, TFAP2⁺, HNK1(CD57)⁺, FOXD3⁺）、かつPAX6⁺ 神経外胚葉性細胞が20％未満

神経堤細胞への分化誘導ワークフロー

hPSCをSTEMdiff™ Neural Crest Differentiation Kitで6日間培養するとNCCが生成されます。
続くNCCの継代方法についてはお問い合わせください。

STEMdiff Neural Crest Differentiation Kitのデータ例

CNS型の前駆細胞を最小限に抑え、高純度のNCC集団を生成

STEMdiff™ Neural Crest Differentiation Kitでの培養6日後、神経堤細胞（SOX10+, 赤; CD271+, 水色）の数はCNS型前駆細胞（PAX6+, 緑）を上回りました。
（A）6日目に継代し2日後に固定した細胞の免疫蛍光チャネル重ね合わせ画像。個々のチャネルは、（B）DAPI、（C）PAX6、（D）SOX10、（E）CD271です。

複数のESおよびiPS細胞株にわたって高純度（>70％ SOX10+）の神経堤細胞分化を促進

（A）6日目のNCC形態を示す代表的な明視野および免疫細胞化学画像。NCC培養物はフェーズダーク形態を示し、神経堤マーカーSOX10およびCD271に陽性です。PAX6+ 神経外胚葉細胞はほとんど含まれません。
（B）SOX10+ およびPAX6+ 細胞の割合の定量化。mTeSR™1またはTeSR™-E8™で維持されたhESCおよびhiPSC株はSOX10+ NCCへ効率的に転換し（85.5±1.6％; 平均±SEM; n = 9）、PAX6+ 神経外胚葉細胞はごく低レベル（5.6±0.7％; 平均±SEM; n = 9）でした。数値は、タイル化画像のDAPI全体に対する陽性率です。ドットは、個々の実験結果を示します。

hPSC由来の神経堤細胞は多能性で、軟骨細胞、骨芽細胞、および末梢神経細胞へ分化可能

（A）細胞周囲の軟骨の沈着を示すアルシアンブルー/核ファストレッドで染色された軟骨細胞ペレットでは計4つのhPSC株がこの系統に正常に分化しました（STiPS-M001をここに示します：X10）。
（B）アルカリホスファターゼ陽性ミネラル沈着を示す骨芽細胞培養では、計4つのhPSC株がこの系統に正常に分化しました（STiPS-M001をここに示します：X4）。
（C）12日間分化後の末梢ニューロンでは、細胞体および軸索に沿ったペリフェリン（緑色）の高発現を伴うニューロンを形成しました（X10）。これらの細胞の一部は、核（青）でBRN3a（赤）も発現し、計6つのhPSC株がこの系統に正常に分化しました（STiPS-M001をここに示します）。