(A) STEMdiff™ Microglia培養系で作製したミクログリアは、4種類の細胞株において、平均で約4倍の増殖を示した。増殖倍率は培養開始から24日目の総細胞数を0日目の播種細胞数で割って算出した。

(B) 同ミクログリアは、培養開始から24日目のフローサイトメトリー解析により、CD45⁺CD11b⁺の共発現およびP2RY12⁺の発現を示した。

(C) 同ミクログリアは、小さな細胞体と分岐した突起を特徴とする正常なミクログリアの形態を示した。培養開始から12日目および24日目の画像は、再播種と回収の前に撮影した。スケールバー = 100 μm。

hPSC由来（iMGL）および初代培養由来（MGL）のミクログリアを樹立した8つの異なる論文からバルクRNA-seqデータセットを抽出し、STEMdiff™ Microglia培養系を用いて樹立したミクログリアのデータと比較した。ヒートマップは、アルツハイマー病、パーキンソン病、およびウイルス性脳炎に関連する特定の遺伝子の絶対発現レベルを示す。差分遺伝子発現解析により、STEMdiff™ Microglia培養系で樹立したミクログリアと、他の3群との間で、遺伝子発現に有意な差が認められた。*= p<0.05（DEseq2、調整済み）。

ミクログリアをSTEMdiff™ Microglia培養系で作製し、100 ng/mLのリポ多糖（LPS）で24時間刺激した。炎症誘発性サイトカイン（TNFα、IL-6、IFN-γ、IL-1β、GM-CSF、IL-12p70、IL-2、IL-8）および抗炎症性サイトカイン（IL-10）の放出をMeso Scale Discovery（MSD）で測定した。予想通り、ミクログリアはLPS処理に応答してサイトカインを放出した。*、p ≤ 0.05; **、p ≤ 0.01; ***、p ≤ 0.001; ****、p ≤ 0.0001。

HPCの播種から34日目に、ミクログリアによるpH感受性バイオインジケーター粒子（小さな点、250 μg/mL）の取り込みをライブイメージングで12時間測定した。時間経過に伴い小さな点の数が減少し、粒子を貪食し赤くなった細胞の数が増えて凝集した。スケールバー = 100 μm。