STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Microglia Differentiation Kit

研究用

STEMdiff Microglia Differentiation Kit（ST-100-0019、本品）とSTEMdiff Microglia Maturation Kit（ST-100-0020）で構成される「STEMdiff Microglia培養系」は、STEMdiff™ Hematopoietic Kit（ST-05310）によってヒト多能性幹細胞（hPSC）から分化させた造血前駆細胞（HPC）を、ミクログリアへ分化および成熟させます。

Mathew Blurton-Jonesの研究室のプロトコル（Abud et al., 2017）に基づき開発されており、純度の高いミクログリア（> 80％ CD45 / CD11b陽性、> 50％ TREM2陽性ミクログリア; < 20％形態学的に異なる単球またはマクロファージ）を得ることができます。
これらの細胞は、神経炎症のモデル化、ヒトの神経学的発達と疾患の研究、共培養アプリケーション、および毒性試験のための多目的な研究ツールとなります。

2018/05/14 12:00の製品情報

本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

＊本品は、造血前駆細胞（HPC）からミクログリア前駆細胞への分化用培地です。ミクログリアへ成熟させるにはSTEMdiff Microglia Maturation Kit（ST-100-0020）が必要になります。

STEMdiff™ Microglia培養系で、hPSC由来HPCからミクログリアへ分化・成熟できます

造血前駆細胞 (HPC) の90%以上をミクログリアに分化できます
STEMdiff™ Hematopoietic Kitで作製したHPCからの分化に適しており、ミクログリアは神経オルガノイドと共培養もできます
ミクログリア分化時にマクロファージまたは単球の混入を抑えます
食作用と活性化を示すミクログリアを得られます
簡易で使用しやすい製品フォーマットです

ミクログリア分化の流れ

ミクログリア前駆体は、hPSC由来HPC (STEMdiff™ Hematopoietic Kitで作製) から24日で得られます。24日目以降、ミクログリア前駆体から機能性ミクログリアへ成熟させます。

データ紹介

既報プロトコルと類似した疾患関連遺伝子を発現します

Bulk RNA-seq datasets were extracted from 8 different publications that generated hPSC- (iMGL) and primary- (MGL) derived microglia and their transcriptional profiles compared to data from from microglia generated with STEMdiff™ Microglia Culture System. The heat map displays absolute expression levels for select genes associated with Alzheimer’s disease, Parkinson’s disease, and viral encephalitis. Significant differences in gene expression between microglia generated with STEMdiff™ Microglia Culture System and any of the other 3 groups were identified by differential gene expression analysis. *, p<0.05 (DEseq2, adjusted). hPSC = human pluripotent stem cell.

炎症シグナルに応答してサイトカインを放出します

Microglia were generated using the STEMdiff™ Microglia Culture System and stimulated with 100 ng/mL LPS for 24 hours. The release of pro-inflammatory (TNFα, IL-6, IFN-γ, IL-1β, GM-CSF, IL-12p70, IL-2, IL-8) and anti-inflammatory (IL-10) cytokines were measured by MSD. The microglia release cytokines in response to LPS treatment, as expected. *, p ≤ 0.05; **, p ≤ 0.01; ***, p ≤ 0.001; ****, p ≤ 0.0001. LPS = lipopolysaccharide; MSD = Meso Scale Discovery.

HPC播種後34日で貪食作用を示す機能性のミクログリアです

濃度250 μg/mLのpH感受性バイオインジケーター粒子（小さな点）を取り込むミクログリアを、生細胞イメージングで12時間にわたって測定しました。粒子が貪食されると、細胞が赤に変わります。時間が経つにつれて、小さな点の数が減少し、赤い細胞の数が増加して凝集しました。Scale bar = 100 μm.

脳オルガノイドとの共培養で取り込まれ、損傷により活性化形態を示します

(A) ミクログリアと脳オルガノイドの共培養10日後の代表的な免疫染色像。ミクログリア (IBA1, 緑) は、ニューロン (MAP2, マゼンタ) の間に取りこまれ、伸展した突起を伴う非活性化形態を示します（矢印）。
(B) 損傷時、ミクログリアはアメーバ状の活性化形態を示します。

詳しくは、学会発表ポスターもご覧ください：神経疾患研究モデルのためのhPSC由来ミクログリア

製品についてのお問い合わせ

掲載製品の技術情報、在庫や価格など、各窓口にお気軽にご相談ください。

	毒物及び劇物取締法の「毒物」（法第2条別表第1）を含む製品です。
	毒物及び劇物取締法の「劇物」（法第2条別表第2）を含む製品です。
	「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」（通称カルタヘナ法）の使用規制対象となる製品です。ご使用に際しては規制に即し適切にお取り扱いください。
	労働安全衛生法の「名称等を表示すべき危険物及び有害物」（法第57条）、あるいは「名称等を通知すべき危険物及び有害物」（法第57条第2項）を含む製品です。
	麻薬及び向精神薬取締法の「麻薬向精神薬原料」（法第2条の7、別表第4）を含む製品です。