STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Microglia Differentiation Kit
- 研究用
STEMdiff Microglia Differentiation Kit（ST-100-0019、本品）とSTEMdiff Microglia Maturation Kit（ST-100-0020）で構成される「STEMdiff Microglia培養系」を用いることで、STEMdiff™ Hematopoietic Kit（ST-05310）によってヒト多能性幹細胞（hPSC）から分化させた造血前駆細胞（HPC）を、ミクログリアへ分化および成熟させることができます。
Mathew Blurton-Jonesの研究室のプロトコル（Abud et al., 2017）に基づき開発されており、純度の高いミクログリア（> 80％ CD45 / CD11b陽性、> 50％ TREM2陽性ミクログリア; < 20％ 形態学的に異なる単球またはマクロファージ）を得ることができます。
これらの細胞は、神経炎症のモデル化、ヒトの神経学的発達と疾患の研究、共培養アプリケーション、および毒性試験のための多目的な研究ツールとなります。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
＊本品は、造血前駆細胞（HPC）からミクログリア前駆細胞への分化用培地です。ミクログリアへ成熟させるにはSTEMdiff Microglia Maturation Kit（ST-100-0020）が必要になります。
STEMdiff™ Microglia培養系をもちいて、hPSC由来ミクログリアの分化と成熟を行うことができます
- HPCの90%以上をミクログリアに分化できます
- STEMdiff™ Hematopoietic Kitで作製したHPCからの分化に適しており、神経オルガノイドと共培養することもできます
- マクロファージや単球の混入を抑えてミクログリアに分化できます
- 食作用と活性化を示すミクログリアを取得できます
- 簡易で使用しやすいフォーマットです
ミクログリア分化の流れ
ミクログリア前駆体は、hPSC由来の造血前駆細胞から24日で作製できます。 造血前駆細胞の作製については、STEMdiff™ Hematopoietic Kit（ST-05310）をご参照ください。ミクログリア前駆体から機能性ミクログリアへの成熟については、製品添付文書をご確認ください。
データ紹介
ミクログリアの分化と成熟時の遺伝子発現パターンは、公開されているプロトコルのものと類似しています
RNA-seqデータセットは、hPSC由来のミクログリアから作製し、その転写プロファイルを他の免疫細胞系（N = 500遺伝子）と比較した4つの異なる公開データ（プロトコルA〜D）から抽出されたものと比較しました。主成分分析（PCA）は、STEMdiff™ Microglia 培養系で作製したミクログリアからのRNA-seqデータと共に解析されました。STEMdiff™ Microglia 培養系のhPSC由来ミクログリアは、プロトコルAおよびBのミクログリアに最も近いことが示されます。
34日目に貪食作用を示すミクログリアを生成します
濃度250 μg/mLのpH感受性バイオインジケーター粒子（小さな点）を取り込むミクログリアを、生細胞イメージングで12時間にわたって測定しました。粒子が貪食されると、細胞が赤に変わります。時間が経つにつれて、小さな点の数が減少し、赤い細胞の数が増加して凝集しました。Scale bar = 100 μm.
ミクログリアは10日後に脳オルガノイドに組み込まれ、損傷により活性化された形態を示します
（A）ミクログリアをIBA1（緑）、ニューロンをMAP2（マゼンタ）で染色した、10日後の代表的なミクログリアと脳オルガノイドの共培養。ミクログリアはニューロンの間で統合され、伸展した突起を伴う非活性化形態を示しています（矢印）。（B）損傷時のミクログリアは、IBA1染色で示されるように活性化されたアメーバ形態となります。
