STEMCELL Technologies CloneR CloneR 2
- 研究用
CloneR™2（ST-100-0691）は、ゲノムの完全性と分化能を維持したヒト多能性幹細胞（hPSC）のクローン細胞株を生成するための、組成が明確（defined）な無血清のサプリメントです。CloneR™2を使用することにより、低密度または高密度での播種を含む高ストレス条件下で、ヒト胚性幹（ES）および人工多能性幹（iPS）細胞のクローニング効率と生存率を高めることができます。
CloneR™2の添加によって、遺伝子編集においてはエレクトロポレーション後およびクローン沈着（clonal deposition）中のESおよびiPS細胞の生存を改善できます（以下のデータを参照）。また、低密度播種（<25細胞/cm2）あるいは1細胞/ウェルのFACSソーティング細胞から生成されたクローン細胞株の生存と拡大を、シングルセルへの馴化を必要とせずに促進します。さらに、ES/iPS細胞株の解凍後の回復といったストレスの多い条件下や、下流での分化に先立って単層を形成する場合などに、高密度播種したシングルセルの生存率を高めることもできます。
CloneR™2サプリメントは、ES/iPS細胞維持用のTeSR™培地シリーズ、および任意の細胞培養マトリックスとの互換性があります。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
CloneR 2は、ヒト多能性幹細胞のシングルセルでの生存率を改善するためのサプリメントです
- より多くのコロニーを迅速に準備 クローニング効率が向上し、コロニー選択までの日数を短縮できます
- 堅牢で一貫性のあるクローニング 培養系や細胞株に依存せず高い性能を発揮します
- 強化された生存率 あらゆる播種密度、およびエレクトロポレーション・解凍など高ストレス負荷後におけるコロニー形成率を改善します
- シングルセルへの直接移行 継代によるシングルセルへの馴化段階は不要です
CloneR 2 データ紹介
Figure 1. CloneR™ and CloneR™2 Supplements Improve Cloning Efficiency and Colony Size
hPSCs display a considerable increase in cloning efficiency when cloned using (B) CloneR™ compared to using (A) Y-27632 compound. (C) CloneR™2 further improves cloning efficiency and increases colony size when compared to either Y-27632 compound or CloneR™. Shown are examples of H9 hESCs in 10-cm dishes, plated at 200 cells per dish (~4 cells/cm²) in mTeSR™ Plus on Vitronectin XF™.
Figure 2. Use of CloneR™2 Enables Improved Cloning Efficiency and Larger Colonies When Compared to Use of CloneR™
(A) Representative images of 200 cells (H9 cell line) in 12-well plates grown in mTeSR™1 on Vitronectin XF™ at day 8 after seeding. Three hES (H1, H7 and H9) and 5 hiPS (WLS-1C, STiPS-F016, STiPS-M001, STiPS-R038 and STiPS-B004) cell lines were seeded at clonal density (50 cells/cm²) on Vitronectin XF™, in mTeSR™1 supplemented with CloneR™ or CloneR™2. mTeSR™1 supplemented with CloneR™2 increases (B) cloning efficiency and (C) colony size of hPSCs when compared with mTeSR™1 supplemented with CloneR™. Each data point in (B) represents an average of 3 technical replicates, with at least 7 biological replicates (n) per cell line.
Figure 3. CloneR™2 Improves Clonal Generation Following Single Cell Deposition
Single-cell deposition is the gold standard of cloning; it relies on a FACS-based method that typically results in low cloning efficiency. Clones generated in mTeSR™ Plus supplemented with CloneR™2 demonstrate significantly improved (E) cloning efficiency and (B, D) colony size when compared to clones generated in mTeSR™ Plus supplemented with CloneR™. (A, C) Representative images of H9 hESCs cultured for eight days plated on Vitronectin XF™. Across four cell lines tested, CloneR™ and CloneR™2 had an average cloning efficiency of 21.2 ± 5.6% and 38.6 ± 6.0%, respectively, with at least 3 biological replicates per cell line. * denotes p < 0.05; *** denotes p < 0.001 by unpaired t-tests.
CloneR2の詳しい特長やデータ
注目の製品ページ：
ヒト多能性幹細胞の生存率を高めるサプリメント「CloneR™2」
研究者の声：
ES/iPS細胞の効率的なゲノム編集のための基盤技術の開発 研究者の声【38】
（シングルセルからのコロニー形成能評価事例）
ウェビナー：
Facilitating hPSC Single Cell Seeding Workflows Using CloneR™2
（視聴にはSTEMCELL Technologies社ウェブでの登録が必要です。）
関連情報
「TeSR + CloneR」ヒト多能性幹細胞（hPSC）ゲノム編集のワークフロー
「mTeSR1」フィーダー細胞が不要なヒトES/iPS細胞維持用 無血清培地
