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STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Trilineage Differentiation Kit

  • 研究用

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STEMdiff™ Trilineage Differentiation Kit(ST-05230)は、新規または確立されたヒトES/iPS細胞株の、3胚葉(外胚葉、中胚葉、内胚葉)に分化する能力を機能面から検証するために簡易的な培養アッセイを行うキットです。本品には、各胚葉を並行して in vitroで分化誘導する専用の完全培地が含まれており、単層培養プロトコルにより1週間以内で、3胚葉分化能を再現性をもって明確に検証できます。

本品は、エンドポイントアッセイでの使用を意図しており、下流の分化などに用いる細胞の作製には最適化されていません。
本品は、mTeSR™1mTeSR™ PlusTeSR™- AOFの各培地で維持された細胞の評価に最適化されています。

2018/05/14 12:00の製品情報

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本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

STEMdiff™ Trilineage Differentiation Kitで、ヒト多能性幹細胞(hPSC)の多能性を3胚葉分化能により評価

  • 複数の多能性幹細胞株で、再現性の高い分化を確認済み
  • 各胚葉を別々に分化させることで、結果の解釈が容易 ※
  • 組成が定義済み(defined)な完全培地
  • 1週間で完了する、標準化されたプロトコル
  • 分化後の細胞を各種アッセイ(フローサイトメトリー、免疫染色、遺伝子解析)に使用可能

※ 3胚葉を同時に分化させるEB法では、細胞株によって分化しやすい胚葉が優先的に分化し結果の解釈が難しくなることがあります。本ページ下部の、「3胚葉分化におけるEB法との結果比較」もご覧ください。

国内ユーザー様の声

従来もちいていたEB法に比べ、2D培養なので維持しやすいです。簡便で低コストな分化能評価法として今後も利用したいです。
(化学メーカー・I様)

EB法に比べ、EBを作らせる等の手間がかからないので使い易く便利だと感じました。
(K大学工学部・I様)

ヒトiPS細胞培養をスタートさせたばかりで分化能評価も初めて行いましたが、スムーズに使用できました。簡便で便利だと思いました。
(A研究所・K様)

3胚葉分化のワークフロー

各胚葉につき、24ウェルプレート1枚分の培養が可能です。

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データ紹介

3胚葉分化の確認(フローサイトメトリー)

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ヒトES細胞 H9株をSTEMdiff™ Trilineage Differentiation Kitで分化させフローサイトメトリーで解析したところ、lineage-specific markerがダブルポジティブとなり各胚葉への分化が確認された。

フローサイトメトリーのプロトコルはこちら>>

3胚葉分化後のマーカー発現

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ヒトES細胞 H9およびH1株の免疫染色結果
左: 外胚葉 - 赤:Pax6、緑:Nestin
中: 中胚葉 - 赤:T、緑:NCAM
右: 内胚葉 - 赤:Sox17、緑:Foxa2

3胚葉分化におけるEB法との結果比較

05230_array.jpg

ヒトES細胞 H9株をSTEMdiff™ Trilineage Differentiation KitおよびEB法(血清入り培地、10日間培養)で分化させ、マイクロアレイによるトランスクリプトーム解析を行った。EB法(右カラム)に比べ、STEMdiff™ Trilineage Differentiation Kitでは胚葉特異的マーカーの発現上昇が明確に確認できた。

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