STEMCELL Technologies STEMdiff STEMdiff Erythroid Kit
- 研究用
STEMdiff™ Erythroid Kit（ST-100-0074）は、ヒト胚性幹（ES）および人工多能性幹（iPS）細胞を、無血清かつフィーダーフリーの条件下で、Glycophorin AおよびCD71を発現する赤血球前駆細胞（赤芽球）に分化させる培地です。簡易な2次元培養の分化プロトコルを、以下の2段階で実施します。
第一ステージ（10〜12日間）では、STEMdiff™ Hematopoietic Supplement A、次いでSupplement E1を基礎培地に添加し、細胞を赤血球分化傾向をもつ中胚葉に誘導します。このステージの最後には、培養上清から造血前駆細胞を簡単に回収できます。
第二ステージ（10〜24日目の14日間）では、Supplement E2とStemSpan™ SFEM IIを用いて、細胞をさらに赤血球前駆細胞に分化させます。赤血球分化の14日間に細胞は通常241 +/- 190倍（95％CI）まで増幅し、24日目の細胞集団には通常74 +/- 5％（95 %CI）のCD71+GlyA+赤芽球が含まれます。
本品で作製した細胞を成熟に適した培養条件に移すと、さらに正赤芽球および網状赤血球へと成熟させることができます。
本品は、mTeSR™1（ST-85850）、mTeSR™ Plus（ST-100-0276）、およびTeSR™-E8™（ST-05990）で維持したヒト多能性幹細胞（hPSC）の分化に最適です。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
STEMdiff™ Erythroid Kitで、hPSCから赤血球前駆細胞に効率良く分化
- 無血清、フィーダーフリーの組成
- 複数のhPSC株から安定して赤芽球を誘導
- 得られる赤芽球はさらなる成熟も可能
データ紹介
CD71+GlyA+ 赤血球を安定的に高効率で作製
hES and hiPS cells were induced to differentiate into CD71+GlyA+ cells using the 24-day protocol. Following the initial 10-day culture period and at the end of the 24-day protocol, cells were harvested from the supernatant and analyzed by flow cytometry. Dead cells were excluded by light scatter profile and propidium iodide staining. (A) Representative flow cytometry plot for iPSC-derived (1C) cells analyzed on day 10. Cells were identified as CD34+CD43+ hematopoietic progenitors. (B) After 24 days of culture, cells were identified as having differentiated into CD71+ GlyA+ erythroblasts.
hPSC由来赤血球のヘモグロビン発現と典型的な形態
(A) Erythroid cells generated with the STEMdiff™ Erythroid Kit express a mix of primitive (embryonic) and definitive (fetal, adult) hemoglobin. Shown are the results of qPCR analysis for globin gene expression after 24 days of culture. (B) A picture of the cell pellet shows that cells produced in culture are hemoglobinized. (C) Cells display typical basophilic erythroblast morphology after 24 days of culture using the STEMdiff™ Erythroid Kit (40X magnification, May-Grunwald Giemsa stain).
詳しいプロトコルとデータはこちら：
STEMdiffをもちいた多能性幹細胞からの赤芽球作製 (STEMCELL Technologies社ウェブサイトへリンク)
製品に関するウェビナーはこちら（視聴にはSTEMCELL Technologies社ウェブサイトでの登録が必要です）：
Serum- and Feeder-Free Differentiation of Erythroid Progenitor Cells from hPSCs
製品記事
ES/iPS細胞からの血球細胞分化にお困りではありませんか 〜分化を成功させるためのポイントとは〜
ES/iPS細胞からさまざまな細胞への分化誘導(STEMCELL Technologies社)
ヒトES/iPS細胞における品質管理の考え方：細胞品質管理のタイミング
