STEMCELL Technologies IntestiCult IntestiCult Organoid Growth Medium (Human)
- 研究用
「IntestiCult™による腸内ウイルス感染の研究」最新情報
IntestiCult™ Organoid Growth Medium (Human) （ST-06010）は、ヒト腸オルガノイドの樹立と維持に最適化された完全培地です。本品で作製した腸オルガノイドを用いて、成人腸上皮の主要な特性をモデル化できます。簡単かつ堅牢なプロトコルにより腸陰窩（intestinal crypts）から1週間でオルガノイドを誘導することができます。濃縮された幹細胞集団の存在によって、他法で増殖が困難なサンプルも含め、幅広いドナーからのオルガノイド増殖が可能です。
本品で培養したオルガノイドは極性化した腸上皮細胞層で囲まれた機能性内腔を持ちます。多様なモデル化アプリケーション向けに、IntestiCult™ Organoid Differentiation Medium (Human; ST-100-0214) を用いて3D培養または2D培養（液内単層か気液界面/ALI）で分化させることができます。
腸オルガノイド培養の用途としては、腸管上皮の発達と機能の研究、腸疾患モデル、腸管モデルでの有効性・毒性の分子スクリーニングなどが挙げられます。また、成体幹細胞の特性や、再生医療の研究にも使用することができます。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
IntestiCult™ OGM (Human)をもちいて、ヒト腸オルガノイドを樹立・維持できます
- 成人腸管上皮の主要な機能を再現した、便利なin vitroの培養系です
- 完全培地のため一貫性ある結果が得られます
- 1週間で腸オルガノイドを樹立できます
- 使い勝手の良いフォーマットと最適化されたプロトコールをご提供します
本品に含まれるもの
- IntestiCult OGM Human Basal medium, 50 mL
- IntestiCult Organoid Supplement, 50 mL
※ 使用前にOGM Human Basal MediumとOrganoid Supplementを等量混合します。混合後は、冷蔵（2 -8℃）で1週間保存可能です。
※ 他にCorning Matrigelなどが必要になります（詳細は製品添付文書を参照）。
※ 腸管オルガノイドの凍結保存には、CryoStor CS10が最適です。
データ紹介
初代腸菅オルガノイドから培養10-14日で完全に成熟
ヒト結腸生検サンプルから分離した初代オルガノイドをIntestiCult Organoid Growth Medium（Human）で増殖培養させた。
（A）培養2日後、（B）6日後、（C）8日後、（D）10日後の腸管オルガノイドをそれぞれ画像化したもの。
腸管上皮細胞のマーカーの発現
（A）DAPI、（B）EPCAM、（C）Ki67に対する免疫蛍光染色像。
（D）（A）～（C）のマージ画像。上皮層（EPCAM+）内で活発に増殖する（Ki67+）腸管幹細胞を示している。
ヒト腸管オルガノイドのフォルスコリン誘発性腫脹
ヒト腸管オルガノイドを（A）5 μMフォルスコリンまたは（B）DMSOで処理し、オルガノイドの面積を処理後0分、120分に測定した。（C）フォルスコリン処理時のオルガノイド面積は、DMSO処理時と比べて増加した（処理前：7.5 ± 0.8 ％、処理後：33.5 ± 3.8 ％）。
複数の細胞外マトリックスでオルガノイド成長をサポート
IntestiCult™ OGM (Human) と以下の各マトリックスを用いてヒト腸オルガノイドを培養し、継代4回目の終わりに撮像した。オルガノイドはいずれも順調に増殖した。
(A) Matrigel® Growth Factor Reduced Basement Membrane Matrix (Corning® #356231)
(B) Geltrex® LDEV-Free Reduced Growth Factor Basement Membrane Matrix (Gibco™ #A1413202）
(C) Cultrex® Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, Type 1 (R&D Systems™ #3433-005-R1)
(D) Cultrex® Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract, Type 2 (R&D Systems™ #3533-005-02)。
