製品の特長

PneumaCult™ -NGEx Mediumで、より長期に高品質なヒト気道上皮細胞を血清・BPEフリー条件で増殖

• 代替品と比較して、3週間の培養で250倍の細胞数。15回以上の継代維持が可能
• 重要マーカー分子の発現パターンと分化ポテンシャルを長期培養で維持し、細胞品質を損なわずにヒト気道のin vivo環境を再現
• 鼻腔、気管支、および小気道上皮細胞を、１つの培地で効果的に拡大培養可能
• 増殖と分化のワークフローを切れ目なく統合でき、PneumaCult™の統一プラットフォーム上でヒト肺をモデリング可能
• 定義済み組成で使用しやすい構成品2つのキットにより、エラーのリスクを軽減し実験成功の機会を向上

PneumaCultによる培養の流れ

PneumaCult™-NGEx培養システムのながれ

PneumaCult™-NGExにより、新鮮サンプルから分離、または市販の凍結保存されたヒト気管支上皮細胞（HBECs）、鼻腔上皮細胞（HNECs）、および小気道上皮細胞（HSAECs）を液中培養することができます。その後、増殖した気道上皮細胞を用いた気液界面（ALI）培養では、HBECsおよびHNECsにはPneumaCult™-ALI（ST-05001）、HSAECsの分化にはPneumaCult™-ALI-S（ST-05050）を基底側のチャンバーに追加して粘液線毛呼吸上皮への分化を促進します。気道オルガノイド培養では、増殖させたHBECsまたはHNECsを細胞外マトリックス（ECM）ドームに埋め込み、PneumaCult™ Airway Organoid Kit（ST-05060）を使用して分化させます。気道上皮頂端へのアクセス可能なオルガノイド培養では、増殖させたHBECsをAggrewell™プレート（ST-34415）に播種し、その後PneumaCult™ Apical-OutAirway Organoid Medium (ST-100-0620）で分化させます。

データ紹介

PneumaCult™-NGExで培養したHBECsは、長期的な継代培養でも基底細胞マーカーの発現を維持しています

ヒト気管支上皮細胞（HBECs）を細胞老化(分裂停止)、までPneumaCult™-NGExで培養し、基底細胞マーカー（A）KRT5（緑）、（B）p63（赤）で染色しました。その結果、ほぼ100％の細胞がKRT5とp63を発現し、それは13代目以降まで維持されました。これにより、長期の培養安定性と分化ポテンシャル維持が確認され、様々な実験への利用可能性が示されました。スケールバー = 100 µm (C) 基底細胞マーカーCD271とCD49fの発現はP3-9の期間ではほぼ100%で維持され、その後の継代でやや低下しました。これにより、PneumaCult™-NGExで培養されたHBECsが長期培養においても基底細胞のアイデンティティを失わないことが確認されました。データは平均 ± 標準偏差、n = 3～4 donor