STEMCELL Technologies PneumaCult PneumaCult Airway Organoid Kit
- 研究用
「PneumaCult™による呼吸器ウイルス感染の研究」最新情報
PneumaCult™ Airway Organoid Kit（ST-05060）は、ヒト気管支上皮細胞（HBEC）由来の気道オルガノイドを効率的に樹立し分化する培地です。血清およびBPEは含まれていません。
HBECはあらかじめPneumaCult™-Ex Plus培地（ST-05040）を用いて2Dで拡大培養しておきます。その後、本品のPneumaCult Airway Organoid Seeding Mediumを用いて3Dのオルガノイド培養を開始します。続いてPneumaCult Airway Organoid Differentiation Mediumを用いて形態学的関連性の高い気道オルガノイドへと分化します。
気道オルガノイドは、気道上皮を研究するための機能的なin vitro 器官培養システムです。完全に分化したオルガノイドは、繊毛細胞や杯細胞などの分化細胞型で構成される極性化した気道上皮細胞層で囲まれた中空構造を示します。これらの気道オルガノイドは、肺疾患モデル、薬物有効性・毒性スクリーニング、気道上皮機能の研究などに用いることができます。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
PneumaCult™ Airway Organoid Kitは、ヒト気道オルガノイドをBPE・血清不含条件下で樹立および分化します
- ヒト気道の重要な特徴をin vitroで再現する3次元培養系です
- ヒト気道上皮細胞の増殖・分化のための完全培地で、PneumaCult™-Ex Plusで培養した細胞に適しています
- 簡素な仕様、利便性の高いプロトコルによって、一貫した結果が得られます
気道オルガノイド作製の流れ
ヒト気道オルガノイド培養前に、PneumaCult-Ex Plus培地を用いた2次元培養でHBECを拡大します。その後、HBECをMatrigel®ドームに埋め込み、PneumaCult Airway Organoid Seeding Mediumを用いて4〜7日間増殖させます。増殖したHBECを、PneumaCult Airway Organoid Differentiation mediumを用いてさらに21日以上分化させます。
データ紹介
完全分化した気道オルガノイド
(A) Bright-field image of airway organoids growing in PneumaCult™ Airway Organoid Seeding Medium at day 7 exhibit basal cell spheroid morphology. (B) Bright-field image of airway organoids differentiated in PneumaCult™ Airway Organoid Differentiation Medium at day 21 exhibit hollow lumens. (C) Airway organoid stained for ZO-1 (junction protein marker, red), MUC5AC (goblet cell marker, purple), AC-Tubulin (ciliated cell marker, green), and DAPI (nuclei, blue).
気道オルガノイドのフォルスコリン誘導性膨潤アッセイ
(A) Forskolin-treated organoids derived from healthy donors increased in size compared to the DMSO control, indicating functional CFTR protein expression. (B) Forskolin-induced swelling is lost in organoids derived from CF donors, but re-established in VX-809-treated airway organoids. Error bars represent ± 95% confidence interval for the mean (n=3). Bright-field images of airway organoids taken during the Forskolin swelling assay at (C) 0 hours and (D) 6 hours show organoid swelling after treatment.
プロトコルはこちら：
嚢胞性線維症および健常ドナー由来の気道オルガノイド膨潤アッセイ
気道オルガノイド継代培養時の形態的特徴の維持
The ciliated cell percentage in organoids grown from (A) healthy and (B) CF donors using PneumaCult™ Airway Organoid Kit increased from P3 to P5. The total and ciliated cells were counted using a hemocytometer. Error bars represent ± 95% confidence interval for the mean (n=3).
