注目の製品情報
2022/05/02
全血からわずか15分でPBMCを調製「SepMate-50」・「SepMate-15」
- 細胞分離
全血から単核球（PBMC）分離の新定番
通常、密度勾配遠心による全血からのPBMCの回収では比重液の上にサンプルを慎重に重層し、ブレーキなしで約30分遠心分離してから目的の層の細胞を慎重に回収し洗浄するため時間と手間がかかるというのが常識でした。
STEMCELL Technologies社の密度勾配遠心専用チューブ「SepMate™」はチューブ内部に特殊な仕切板を挿入しており、リンパ球分離溶液「Lymphoprep™」の上に全血（ヒト末梢血）を容易に重層することができるため作業の習熟が必要なく、単核球（PBMC）を簡便かつ短時間で回収することができます。
SepMate™とリンパ球分離溶液「Lymphoprep™」を併用することで注意すべきポイントが明確になり、一貫したサポートが可能です。
（更新：2022年5月12日）
SepMateとは
末梢血から密度勾配溶液で密度勾配遠心（比重遠心）で単核球を分離する際、通常のチューブの代わりに「SepMate™」を使用すると、単核球の回収がデカンテーションだけの非常に簡便かつ短時間な操作で終了します。適切な比重液さえ使用すれば、ヒト以外の動物にも適用可能。細胞分離前のサンプル調製などに最適です。
さらに、比重遠心による細胞分離試薬「RosetteSep™」と組み合わせて使用すれば、比重遠心後にデカンテーションするだけでT細胞やB細胞など目的の細胞集団を約25分で簡便に回収できます。
SepMate™には2種類のサイズがあり、SepMate™-50は4 - 17 mLの全血、SepMate™-15は0.5 - 5 mLの全血からの末梢血単核球の回収に利用できます。
SepMateの特長
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Lymphoprepとは
Lymphoprep™は、末梢血、臍帯血、骨髄から細胞密度の違いを利用した単核細胞（MNC）の分離適した密度勾配溶液（比重液）です。
顆粒球と赤血球は単核細胞よりも密度が高いため、遠心分離中にLymphoprep™の層に沈殿します。
Ficoll-Paque™と同じプロトコルで使用でき、SepMate™と一緒に使用できます。
Lymphoprepの仕様
- 比重： 1.077 ± 0.001 g/mL
- 主成分： Polysaccharide（5.7% w/v）、Sodium diatrizoate（9.1% w/v）
- エンドトキシンテスト済み（通常 0.13 EU/mL以下）
- オートクレーブ滅菌済み
- GMPおよびISO13485に準拠し製造
SepMateとLymphoprepのプロトコール 操作概要
PBMC調製の手順
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SepMate™を用いてヒトPBMCを回収するプロトコールの概要です。 詳しくは製品添付文書 をご参照ください。
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SepMateの動画マニュアル
わずか15分で、どなたでも簡単にPBMCを分離する方法をご確認ください。（所要時間 1:46）
SepMateのデータ
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SepMate™-15の使用の有無でMNCの回収率に有意差はない その他のデータは、学会発表ポスター をご覧ください。
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ヒト以外の動物種での使用実績
SepMate™はヒト以外の動物種でも、PBMCの調製のために使用されてきました。これまでにサル（非ヒト霊長類）1,2、ブタ3、イヌ4、ウマ5、ヤギ6などで報告されています。各動物種に適した密度の比重液をご利用ください。
文献
- Yacoob C, Lange MD, Cohen K, Lathia K, Feng J et al. (2018) B cell clonal lineage alterations upon recombinant HIV-1 envelope immunization of rhesus macaques. PLoS Pathog 14(6): e1007120.
- Termini JM, Magnani DM, Maxwell HS, Lauer W, Castro I et al. (2017) Simian T Lymphotropic Virus 1 Infection of Papio anubis: tax Sequence Heterogeneity and T Cell Recognition. J Virol 91(20).
- Dhakal S, Goodman J, Bondra K, Lakshmanappa YS, Hiremath J et al. (2017) Polyanhydride nanovaccine against swine influenza virus in pigs. Vaccine 35(8): 1124–31.
- Gibbons N, Goulart MR, Chang Y-M, Efstathiou K, Purcell R et al. (2017) Phenotypic heterogeneity of peripheral monocytes in healthy dogs. Vet Immunol Immunopathol 190: 26–30.
- Korovina DG, Yurov KP, Alexeenkova S V, Savchenkova EA & Savchenkova IP. (2017) Characterization of multipotent mesenchymal stem cells isolated from equine umbilical cord blood. Russ Agric Sci 43(3): 262–5.
- Baliu-Piqué M, Verheij MW, Drylewicz J, Ravesloot L, de Boer RJ et al. (2018) Short Lifespans of Memory T-cells in Bone Marrow, Blood, and Lymph Nodes Suggest That T-cell Memory Is Maintained by Continuous Self-Renewal of Recirculating Cells. Front Immunol 9: 2054.
ユーザーの声
SepMate™を使用した海外研究者の声をご紹介します。
・ヒトおよびチンパンジー血液からのPBMC分離
Hugo Hilton, Stanford University
「SepMate™-50は明らかにシンプルなテクノロジーによって、研究室に共通した問題を解決します。時間の節約と、PBMC分離不良によるサンプル損失の削減が可能になりました。従来のフィコール分離と同数のNK細胞を回収できます。」
詳しくは：Biocompare
・PBMC分離
Esperanza Perucha, PhD, Academic Rheumatology King’s College London, UK
「昨日SepMate™チューブをテストしましたが、それらは…素晴らしく機能しました！同じサンプルを標準プロトコールで並行して実施しましたが、細胞回収率は同じでした（もちろん4分の1の時間で）。」
SepMateとLymphoprepのお得なセット
SepMate™ Medium Kitは、簡便、確実かつ迅速なPBMCを回収できるSepMate™と、回収時に用いる密度比重液Lymphoprep™のセット品です。
それぞれを単品購入するよりもお得に購入できます。
| SepMate™-15 Medium Kit 商品コード：ST-86415-LYM |
SepMate™-15 100本入（ST-86415） Lymphoprep™ 500 mL x 1本（ST-07851） |
|---|---|
| SepMate™-50 Medium Kit 商品コード：ST-86450-LYM |
SepMate™-50 100本入（ST-8645）） Lymphoprep™ 500 mL x 6本（ST-07861） |
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