STEMCELL Technologies StemSpan StemSpan T Cell Generation Kit
- 研究用
StemSpan™ T Cell Generation Kitは、ヒトの臍帯血（cord blood; CB）由来CD34+細胞から、CD4+CD8+二重陽性（DP）のT細胞を増殖させる培地製品です。間質細胞や血清を使用しない2段階のプロトコルを用いて、数千個のT細胞を増幅させます。
ステップ1では、2週間の培養でCD34+細胞からCD7+CD5+前駆T（pro-T）細胞への増殖と分化を促進します。ステップ2では、pro-T細胞を、成熟サプリメントを含む培地でさらに4週間培養し、CD4+CD8+ DP T細胞への成熟を促進します。さらに1週間の追加刺激（オプション）でCD8+単一陽性（SP）T細胞に成熟できます。
本品に含まれる全試薬は、個別購入も可能です。
StemSpan™ Lymphoid Progenitor Expansion Supplement（10X）（pro-T細胞への増殖と分化を選択的に促進）、StemSpan™ T Cell Progenitor Maturation Supplement (10X)（pro-T細胞からDP T細胞への成熟を促進、CD8 SP T細胞への成熟もサポート）はともに、StemSpan™ SFEM II培地と併用し、StemSpan™ Lymphoid Differentiation Coating Material (100X)でコーティングしたプレート上で使用するよう設計されています。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
StemSpan™ T Cell Generation KitでCD34+細胞からT細胞を産生
- 定義済みの培養条件 血清・フィーダーを使わないため、それらに由来する変動を回避可能
- 優れた性能 臍帯血由来CD34+細胞当たり20,000個以上のDP T細胞を産生
- 簡単 間質細胞（フィーダー）の継代が不要
データ紹介
14日間培養後のCD7+CD5+ Pro-T細胞の頻度と収量
臍帯血（CB）由来のCD34+細胞（単離した新鮮細胞または凍結細胞）を、Lymphoid Differentiation Coating Material（# ST-09925）でコーティングしたプレート上で、Lymphoid Progenitor Expansion Supplement（# ST-09915）を添加したStemSpan™ SFEM IIを用いて14日間培養しました。
（A）細胞を回収しフローサイトメトリーによってCD7およびCD5の発現を分析しました。
（B）14日目の生存CD7+CD5+ pro-T細胞の平均頻度は70％であり、播種したCD34+細胞あたり約200個のCD7+CD5+細胞が産生されました。データは平均値を95％信頼区間とともに示しています（n = 33）。
42日間培養後のCD4 未成熟SP（ISP）およびCD4+CD8+ DP細胞の頻度と収量
CB由来のCD34+細胞（単離した新鮮細胞または凍結細胞）をStemSpan™ T Cell Generation Kit（# ST-09940）で42日間培養し、（A）フローサイトメトリーでCD4、CD8、CD3およびTCRαβの発現を分析しました。
CD4 ISP、二重陽性細胞（CD4+CD8+）およびCD3+TCRαβ+発現二重陽性細胞（CD4+CD8+CD3+TCRαβ+）について、（B）頻度および（C）収量を示しています。平均して、全生存細胞の38％がDP（CD4+CD8+）であり、うち35％がCD3とTCRαβを共発現していました。播種したCD34+細胞あたりの総DP細胞およびCD3+TCRαβ+ DP細胞の収量は、それぞれ約23,000および約9,000でした。データは平均値を95％の信頼区間とともに示しています（n = 31）。
49日間培養後のCD8 SP T細胞の頻度と収量
DP細胞をT Cell Progenitor Maturation Supplement（# ST-09930）、IL-15（# ST-78031）およびImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T Cell Activator（# ST-10970）を添加したStemSpan™ SFEM IIでさらに7日間培養することにより、CD8 SP T細胞へと成熟させました。
49日目に（A）CD3、TCRαβ、CD4およびCD8の発現についてフローサイトメトリー分析しました。
（B）CD3+TCRαβ+発現細胞とそのサブセットの頻度と収量を示しています。平均して、CD3+TCRαβ+細胞の54％がDP（CD4+CD8+）であり、38％がCD8 SP（CD4-CD8+）でした。播種したCD34+細胞あたりのCD8 SP T細胞の平均収量は約6,000でした。CD3+TCRαβ+CD4 SP（CD4+CD8-）T細胞は非常に低い頻度で検出されました（データ非表示）。データは平均値を95％信頼区間とともに示しています（n = 12）
