製品の特長

Dynabeads™ Carboxylic Acid for RNA Purification で mRNAを高純度に精製

• 効率性 - 簡易なワークフローで6回以上再利用できるため、コストと時間を削減
• 拡張性 - 必要な規模（マイクログラムからグラムのmRNA）とスループットに合わせて、手動と自動のワークフローを変更可能
• 品質 - RNAベースの創薬から商業生産まで、技術や原材料を切り替えることなく一貫して使用できる磁気ビーズ

mRNA精製の流れ

試験管内転写 (IVT) 反応ステップからの未精製 RNA をビーズと混合し、バッファーを加えます。RNAはビーズ表面に結合し、反応混合物の残りの成分は、磁石を当てて上清を捨てることで除去します。（下のワークフロー図(B) 参照）

再利用と自動化が可能な磁性ビーズ

ビーズは精製水中に保存されており、少なくとも6回の再利用ができます。KingFisher自動精製ワークフロー用のスクリプトがございます。

本品はビーズ単体です。同一のビーズは以下のキットにも含まれています：
Dynabeads RNA Purification Kit
Dynabeads In Vitro Transcription and RNA Purification Kit

商業用供給に関して

mRNAワクチンや治療薬のGMP適合製造に関するサポートについては、弊社までお問い合わせください。

製品仕様

• 濃度：　10 mg/mL
• 製品タイプ：　磁性ビーズ
• ビーズ直径：　1 μm
• ビーズ材質：　磁性ポリスチレン
• 使用対象（アプリケーション）：　IVT で合成されたmRNAの精製、ワクチン及び治療薬開発の研究向け
• ハイスループット適合性：　あり
• 認証／コンプライアンス：　ISO 13485

固相RNA合成・精製のワークフロー

(A) ビオチン化鋳型は、ビオチン化フォワードプライマーと非ビオチン化リバースプライマーを用いて、プラスミド構築物または合成DNA構築物中の標的配列をPCR増幅することにより作製されます。PCR増幅の代替法として、正しいプラスミド設計があれば、直鎖化プラスミドを、5' オーバーハング配列のビオチン-dUTPのフィルイン反応によってビオチン化することができます。ビオチン化鋳型は、Dynabeads Streptavidin for In Vitro Transcription ビーズに直接固定化され、事前の精製は不要です。ビーズに固定化された鋳型は IVT にそのまま使用され、その後磁気分離によって合成mRNA から除去されます。鋳型は、連続した IVT 反応で少なくとも 6 回再利用できます。
(B) IVT ステップで得られた未精製 RNA を Dynabeads Carboxylic Acid for RNA Purification と混合し、Dynabeads RNA Binding Buffer を加えます。RNAはビーズ表面に結合し、反応混合物の残りの成分は磁石を当てて上清を捨てることにより除去します。

データ紹介

(A) IVTで鋳型を6回連続で再利用した場合、RNA 収量には再現性が見られます。
(B) 1、3、6回目のIVTで合成されたRNAの電気泳動像の重ね合わせは、RNAの完全性が同一であることを示しています。
(C) qPCRで検出される、再利用中の鋳型の溶出は低くなりました。最初のIVT工程で最も溶出量が多く、DNase処理も別の精製工程も行わずに、マイクログラムの未精製 RNA中にわずかピコグラムのDNAしか認められませんでした。LC-MS/MS による未精製IVTサンプル中のヌクレオシド定量では、総核酸中に0.01% 未満のDNAが確認されました (data not shown)。