基本ワークフローと関連製品 概要

• 単球の分離からM1、M2aマクロファージの活性化まで最短6日で完了
• 得られたマクロファージは機能的でかつ食作用があり、TNF・IL12 / IL10を産生

単球の分離

EasySep Human Monocyte Isolation Kitによるヒト単球分離

EasySep Human Monocyte Isolation Kit（製品コード：ST-19359）は、ヒトの新鮮/結保存PBMCあるいはアフェレーシスサンプルから単球を最短12.5分でネガティブ分離するキットです。また、キット中の Platelet removal cocktailを併用することで、血小板の混入を1/10に減らすことができます。カラムを使用しないため、細胞へのダメージを最小に抑えます。

EasySep Human Monocyte Isolation Kitでネガティブ分離したヒト末梢血由来単球

※　ヒト全血から単球の分離には、EasySep Direct Human Monocyte Isolation Kit（製品コード：ST-19669）あるいはRosetteSep Human Monocyte Cell（同：ST-15028、ST-15068）もご利用になれます。
※　マクロファージへの分化を目的としたヒト単球分離には、ネガティブ分離製品を推奨しています。

マクロファージへの分化・活性化

ImmunoCult-SF Macrophage Mediumによるマクロファージの分化・活性化

ImmunoCult-SF Macrophage Medium（製品コード：ST-10961）は、スケジュールに合わせて6日または8日間のプロトコールを選択可能です。任意の活性因子（サイトカイン他）を添加して、M1またはM2aマクロファージを選択して回収することもできます。

M1/M2aマクロファージ分化への流れ

ImmunoCult-SF Macrophage Medium の特長

• 成分が明らか：無血清・血清添加不要
• 最適化：マクロファージの分化および活性化に最適化済
• 安定した結果：M1またはM2aフェノタイプのマクロファージを高収率で回収
• フレキシブル：スケジュールにあわせた8日あるいは6日のプロトコールを選択可
• 任意の活性因子を添加することで、M1またはM2aマクロファージを選択的に回収

データ紹介

ImmunoCult-SF Macrophage Mediumで高収率に活性化マクロファージを回収

ImmunoCult-SF Macrophage Mediunは、競合品に比べてM1およびM2aマクロファージの収率が高く、競合品の約2倍量の細胞が得られます。

ImmunCultで得られたM1およびM2aマクロファージ

M1/M2aマクロファージの表現型・免疫機能評価

ImmunoCult-SF Macrophage Mediumで活性化したM1マクロファージはTNFおよびIL12を分泌し、 M2aマクロファージはIL10を分泌かつ安定した食作用を示します。
下図では、ImmunoCult-SF Macrophage Mediumで培養し、IFN-γ + LPS（M1）または IL-4（M2a）を添加して活性化させたマクロファージの培養8日目の培養上清をELISAで測定しました（8日間のプロトコールで実施）。
（左）M1マクロファージ：2821±396 pg/mL TNF-α（n=24）、656±86 pg/mL IL-12p70 （n=25）。
（右）M2aマクロファージ：29±6 pg/mL IL-10（n= 21）に対し、TNF-αはほとんど分泌されません（TNF-α :below limit of detection, n=20）。
Data： mean ± SEM。

分化したM1およびM2aマクロファージの食作用

（A）大腸菌を取り込んだM1マクロファージ（紫）、M2aマクロファージ（橙）およびネガティブコントロール（黒）をフローサイトメーターで解析した結果です。
（B）M1マクロファージおよびM2aマクロファージの食作用の平均値（%）を示しています（Mean ± SEM, n=3）。

関連情報

関連製品

• 

  ImmunoCult-SF Macrophage

• 

  EasySep Human Monocyte Isolation Kit

• 

  EasySep Direct Human Monocyte Isolation Kit

• 

  RosetteSep Human Monocyte Enrichment Cocktail