FAQ
- 細胞分離
- 用途別細胞培養
- ヒトPBMC活性化の評価実験に使用できる製品はありますか
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目的：ヒトPBMCの標的菌による活性化を検出し、またその活性化の程度を評価したい。ELISPOTでおこなうことは可能ですか。
T細胞の活性化は再刺激によるサイトカイン産生の定量、抗体産生細胞については分泌された抗体の定量を検討できればと考えています。
このような実験に使用できる製品を教えてください。回答：ELISPOTの大きな利点は、抗体種を特定することで感染からどの程度の免疫系が活性化をしているかに関しての指標が得られることにあります。弊社ではELISPOTキットのお取り扱いはございませんが、前段階でおこなう細胞分離・細胞刺激に関しては下記の製品がご利用いただけます。
細胞分離製品に関して：
PBMCを刺激し活性化した際に培養細胞でよく散見されることとして、PBMC中のマクロファージがT細胞などの増殖よりも早く、培地表層が覆われてしまうことがございます。
そのため、最低限CD14などを取り除く製品を用いてマクロファージを除去されることをおすすめいたします。
CD14発現細胞の除去に関連し、弊社では汎用性の細胞分離キット（リンク資料の42ページ）のお取り扱いがありますので、お手持ちの抗体と組み合わせてのご使用をご検討頂ければと存じます。
また、形質細胞に関してはCD138が共通マーカーであり、下記製品でポジティブ分離が可能です。また、下記製品はB細胞を分離して解析される場合にも有効です。
EasySep™ Human CD138 Positive Selection Kit II（ST-17877）
https://cdn.stemcell.com/media/files/pis/DX21711-PIS_1_0_0.pdf?_ga=2.24688250.119125091.1586132616-2040961721.1585274341
PBMCの活性化に関して：
解析系に依存いたしますが、下記製品はPBMC活性化にお使い頂けるものとなっております。
Dynabeads T-activator CD3/28
ImmunoCult T-activator CD3/28
