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ラーニングコーナー

2000/02/14

Method Library -細胞培養-

  • 用途別細胞培養

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ラボの基本

ラボを初めて使用する場合でも、知識を更新する必要がある場合でも、参照する基礎研究手法に関するリソースがあると便利です。
細胞培養、基本的な細胞分離法、基本的な細胞アッセイ、またはその他の重要な分子生物学技術の概要については、ここから始めてください。

Protocol 細胞培養用の半固体メチルセルロース培地を調製およびプレートする方法
多能性幹細胞培養のためにビトロネクチンXF™で培養器具をコーティングする方法
凍結プライマリー細胞を解凍する方法
細胞培養のための低酸素環境を整える方法
末梢血単核細胞(PBMC)を凍結保存する方法
Tech Tip 多能性幹細胞培養用のマトリゲル®コーティングプレート
ヒト多能性幹細胞用のビトロネクチンXF™マトリックス

多能性幹細胞

多能性幹細胞の再プログラミング
ドナーサンプルまたは他の初代組織から人工多能性幹細胞(iPSC)を再プログラミングすることは、複雑なプロセスになる可能性があります。
さまざまな方法を使用してiPS細胞を効率的に生成するためのリソースを以下に示します。
フィーダーフリーのリプログラミング、非統合ベクターの使用、尿由来上皮細胞からのiPSCの生成などのトピックに関するプロトコルとビデオをご覧ください。

Tech Tip TeSR™-E7™を使用して体細胞を再プログラミングするためのヒント
Technical Bulletin TeSR™-E7™エピソームプロトコル
TeSR™-E7™またはReproTeSR™のエピソームベクターシステムを使用して、ヒト尿由来細胞を人工多能性幹細胞に再プログラミングする
Video ReproRNA™-OKSGMを使用して線維芽細胞をヒト人工多能性幹(iPS)細胞に再プログラムする方法
TeSR™-E7™リプログラミング培地でリプログラミングされたiPS細胞コロニーを回収する方法

多能性幹細胞の維持
ダウンストリームアプリケーション用に高品質のhPSCを維持するには、一貫したinvitro細胞培養条件と取り扱い技術が必要です。
細胞培養と品質管理のためのこのリソースのコレクションで標準化のヘルプを入手してください。
プレートコーティング、継代、遺伝子解析実験の実行などのトピックに関するサポートとプロトコルがあります。

Protocol 多能性幹細胞のフィーダーフリー培地からmTeSR™Plusへの移行
多能性幹細胞培養のためにビトロネクチンXF™で培養器具をコーティングする方法
ReLeSR™を使用したヒト多能性幹細胞の酵素を用いない継
Gentle Cell Dissociation Reagentを使用したヒト多能性幹細胞の酵素を用いない継代
CryoStor®CS10でヒト多能性幹細胞を凍結保存する方法
Tech Tip 酵素を含まない継代と、Gentle Cell Dissociation Reagentを用いたヒトESおよびiPS細胞からのシングルセルの生成
ReLeSR™を使用して簡単に多能性幹細胞を継代する方法
ヒト多能性幹細胞用のビトロネクチンXF™マトリックス
多能性幹細胞培養用のマトリゲル®コーティングプレート
STEMdiff™Trilineage分化キット:3つの生殖系統への分化の評価
hPSC培地の最適pHの確保
ヒト多能性幹細胞培養のトラブルシューティングガイド
hPSCの形態の評価
維持培養と分化のためのhPSC凝集体のカウント
ES / iPS細胞の凍結保存と解凍
Technical Bulletin ヒト胚性および人工多能性幹細胞の酵素を含まない継代
mTeSR™1またはTeSR™-E8™でのヒト多能性幹細胞の週末作業のない培養
hPSC遺伝子解析キットの技術的なヒントとコツ
Video ReLeSR™選択と継代試薬を使用して多能性幹細胞を継代するためのタッピング技法
hPSC遺伝子解析キット実験でアッセイを設定する方法
ヒト多能性幹細胞を他のフィーダーフリー培地からmTeSR™Plusに移行する方法
mTeSR™Plusでヒト多能性幹細胞(hPSC)培養用のプレートをコーティングする方法
mTeSR™Plusで細胞凝集体を生成してヒト多能性幹細胞(hPSC)を継代する方法
mTeSR™Plusでヒト多能性幹細胞(hPSC)の形態を維持および評価する方法

多能性幹細胞の分化
hPSCから目的の細胞タイプを導き出すには、最適な一貫性と収量を得るための厳密な式とプロトコルが必要です。
これらの詳細でありながらユーザーフレンドリーなプロトコルに従って、差別化手順を標準化します。
胚様体の生成、神経細胞の誘導、および他の特殊な細胞タイプの導出のための技術的なプロトコルとビデオから選択します。

Protocol 多能性幹細胞からNK細胞を生成する方法
多能性幹細胞からT細胞を生成する方法
Tech Tip AggreWell™でEBまたはスフェロイドサイズを制御する
STEMdiff™Trilineage分化キット:3つの生殖系統への分化の評価
維持培養と分化のためのhPSC凝集体のカウント
Technical Bulletin STEMdiff™APEL™培地
Video STEMdiff™神経誘導培地を使用してhPSCから神経前駆細胞を生成する方法
AggreWell™マイクロウェルプレートを使用して、均一でサイズが制御された3Dスフェロイド培養を生成する方法


懸濁液中の多能性幹細胞の培養

研究で多能性幹細胞の大集団が必要な場合は、浮遊培養と流加培養を使用することが効果的なソリューションです。
浮遊培養の塊として細胞を継代する方法など、hPSCのスケールアップをサポートするためのリソースをここで見つけてください。

Technical Bulletin mTeSR™3D:浮遊培養hPSCの凝集継代法
Video mTeSR™3D培地を用いた3D浮遊培養におけるヒト多能性幹細胞の大規模増殖
凝集継代法を用いてmTeSR™3D浮遊培養でhPSC凝集体を継代する方法

乳腺細胞・神経細胞

乳腺細胞培養
乳腺組織の分離、アッセイの設定、または乳腺球の培養を学ぶ場合、事前にテストされたプロトコルと確立された製品を使用すると、乳腺研究を前進させるのに役立ちます。
ヒトおよびマウスの乳腺上皮細胞の単層および腫瘍球培養、または乳がん幹細胞を検出するためのALDEFLUOR™アッセイの使用などのトピックに関するサポートについては、これらのリソースをご覧ください。

Protocol 浮遊培養で細胞スフェアを数える方法
Technical Bulletin ヒト乳腺上皮細胞の単層培養
マウス乳腺上皮細胞の単層培養
ヒト乳がん細胞株の腫瘍球(Tumorsphere)培養

神経細胞培養
多能性幹細胞から神経細胞を誘導する場合でも、組織から分離する場合でも、適切なプロトコルを持つことが、適切な細胞の特性評価と分化の鍵となります。
このリソースのコレクションを使用して、神経誘導、特性評価、および目的の細胞タイプの保存に関するサポートを受けてください。
神経誘導のための単層および胚様体ベースのプロトコル、幹細胞および前駆細胞の同定などのトピックに関するプロトコルとヒントを見つけることができます。

Protocol 浮遊培養で細胞スフェアを数える方法
ニューロスフィア(Neurospheres)を凍結保存する方法
神経オルガノイド培養
Tech Tip 単層培養を使用したヒト多能性幹細胞(hPSC)の神経誘導
初代由来の神経幹細胞と前駆細胞を培養するためのワークフロー
AggreWell™でEBまたはスフェロイドサイズを制御する
STEMdiff™神経誘導システムでEBベースのプロトコルを使用してhPSC由来の神経前駆細胞(NPC)を取得する
STEMdiff™神経誘導培地とSTEMdiff™SMADi神経誘導キット
Technical Bulletin hPSCの神経誘導のための単層培養法
Video STEMdiff™神経誘導培地を使用してhPSCから神経前駆細胞を生成する方法
AggreWell™マイクロウェルプレートを使用して、均一でサイズが制御された3Dスフェロイド培養を生成する方法

造血幹細胞・免疫細胞・間葉系間質細胞・骨髄細胞

造血幹細胞と前駆細胞
最適化された培養条件と造血幹細胞および前駆細胞(HSPC)の正確な分析は、研究にプラスの違いをもたらす可能性があります。
造血細胞の培養、分化、および特性評価に関する情報とサポートについては、CFUアッセイ、in vitro毒性試験、HSPCの分化などのトピックに関するプロトコルと技術的なヒントのコレクションをご覧ください。

Protocol CFUアッセイから細胞を回収する方法
細胞培養用の半固体メチルセルロース培地を調製およびプレートする方法
Tech Tip 無血清培養でのCD34 +細胞の増殖
MethoCult™メディアを使用したCFUアッセイでの湿度の維持
ヒト造血幹細胞および前駆細胞マーカーと表現型パネル
SFEMIIおよびUM729によるCD34 +細胞の無血清増殖
CFUアッセイにおける造血前駆細胞の培養と分析
CFUアッセイの寿命を延ばす
Technical Bulletin 内皮プロテインC受容体(EPCR):マウス造血幹細胞の同定とポジティブセレクションのための新しいマーカー
マウスBFU-E検出用に最適化されたMethoCult™製剤
ALDEFLUOR™による生存可能な幹細胞および前駆細胞の同定
STEMdiff™APEL™培地
ラット造血コロニー形成単位(CFU)アッセイ用のMethoCult™
InVitro血液毒性試験( In Vitro Hematotoxicity Testing)用の培地とサプリメント
StemSpan™培地とサプリメントを使用した造血幹細胞と前駆細胞のナチュラルキラー(NK)細胞への増殖と分化
Video Global Proficiency Testing ProgramsのためのCFUアッセイの説明
造血コロニーの列挙と識別:簡単な概要
SmartDish™を使用してカスタム造血トレーニングコースのCFUアッセイを設定する方法
カスタム造血トレーニングコースのCFUアッセイのセットアップ
Hematopoietic Colony-Forming Unit (CFU) アッセイの設定方法
STEMvision™を使用してCFUアッセイでの造血コロニーカウントを標準化および自動化する方法

免疫細胞培養
免疫細胞療法は急速に進歩している分野です。追いつくには、免疫細胞の拡大、分化、およびゲノム編集のための最適化されたプロトコルが必要です。
免疫細胞の増殖、免疫細胞のゲノム編集、CAR T細胞の製造などのトピックに関する、技術リソースと研究のサポートを以下で見つけてください。

Protocol ウエスタンブロッティングによって細胞外小胞を特徴づける方法
多能性幹細胞からNK細胞を生成する方法
多能性幹細胞からT細胞を生成する方法
Technical Bulletin ヒトT細胞増殖プロトコルの最適化:初期細胞希釈の影響
StemSpan™培地とサプリメントを使用した造血幹細胞と前駆細胞のナチュラルキラー(NK)細胞への増殖と分化
ヒト初代T細胞のゲノム編集
STEMdiff™およびStemSpan™培地とサプリメントを使用した、ヒト多能性幹細胞からのナチュラルキラー細胞とT細胞の生成
Video CAR T細胞製造ワークフロー:分離、活性化、増殖

間葉系間質細胞培養
マウス組織から間葉系間質細胞(MSC)を分離するのは難しい場合があります。これらのリソースを調べて、マウスのMSC分離プロセスを最適化し、MSC培養の品質を確保してください。
マウスMSCの低酸素培養、マウスの緻密骨からMSCを分離するための組織処理などのトピックに関するサポートがあります。

Protocol 細胞培養のための低酸素環境を整える方法
ウエスタンブロッティングによって細胞外小胞を特徴づける方法
Tech Tip 初代マウス間葉系幹細胞および前駆細胞(MSC)を誘導および増殖する際に考慮すること
間葉系間質細胞の骨形成分化中の細胞剥離の防止
Video マウスの緻密骨(Compact Bone)から間葉系間質細胞(MSC)を分離する方法

骨髄細胞培養
正常および異常な骨髄細胞の研究には多数の細胞が必要になる可能性があり、開始細胞の数と質によっては困難な場合があります。
骨髄細胞培養に関する情報とサポートについては、技術リソースのコレクションをご覧ください。
白血病細胞の培養と増殖、赤芽球前駆細胞の分化と成熟などの手順に関するプロトコルと技術的なヒントを見つけることができます。

Tech Tip 培養で増殖した赤血球前駆細胞の成熟
Technical Bulletin 赤血球前駆細胞の増殖と分化のためのStemSpan™培地とサプリメント
StemSpan™培地を用いた白血病幹細胞および前駆細胞の培養
StemSpan™白血病細胞培養キットを使用したinvitro薬物スクリーニング

腸細胞・肺細胞

腸細胞培養
腸オルガノイドは、腸上皮を研究するための革新的な新しいモデルシステムを提供しています。
オルガノイドを研究に追加するためのサポートについては、以下の技術リソースのコレクションをご覧ください。
凍結保存、単層としての増殖、腸腫瘍サンプルの培養など、オルガノイドとしての腸上皮の培養に関する情報を見つけることができます。

Protocol 単層としてまたは気液界面で培養された上皮細胞の免疫細胞化学(ICC)染色を実行する方法
ヒト腸オルガノイドのCRISPR-Cas9ゲノム編集
Tech Tip マウス腸オルガノイドを培養するための重要なステップ
Technical Bulletin IntestiCult™オルガノイド増殖培地(マウス)を使用した腸上皮オルガノイド培養
IntestiCult™オルガノイド増殖培地(ヒト)の補足プロトコル
IntestiCult™オルガノイド増殖培地(ヒト)を使用した癌由来オルガノイドの培養
Video マウス腸オルガノイドの培養方法:はじめに
マウス腸オルガノイドを培養する方法:腸陰窩の分離とオルガノイドの確立
マウス腸オルガノイドの培養方法:継代
マウスオルガノイド培養の腸陰窩を数える方法
ALI培養における上皮バリアの完全性を評価するためにTEER測定を実行する方法

肺細胞培養
初代ヒト気道上皮細胞の拡大、維持、および分化は困難な場合があります。
気液界面培養条件の最適化などのトピックをサポートするためのプロトコルと技術的なヒントのコレクションをご覧ください。

Protocol 単層として、または気液界面で培養された上皮細胞の免疫細胞化学(ICC)染色を実行する方法
Tech Tip 気液界面でヒト気管支上皮細胞を培養するための重要なポイント
Technical Bulletin 呼吸器研究のための気液界面培養
Video 呼吸器研究に気液界面培養を使用する理由:Dr. Wadsworthとの質疑応答
気液界面で人間の気道をモデル化する方法:はじめに
気液界面での人間の気道のモデル化方法:ヒト気管支上皮細胞(HBECs)の増殖
気液界面でのヒト気道のモデル化方法:ヒト気管支上皮細胞(HBECs)の分化
ALI培養における上皮バリアの完全性を評価するために経上皮電気抵抗(TEER)測定を実行する方法

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