FAQ
- タンパク・遺伝子発現解析
- Dynabeadsを用いて、酵母からmRNAを分離した例はありますか？
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下記論文を参照ください。 Dynabeads Oligo(dT) (Dynabeads mRNA DIRECT Kitに入っているビーズ)は これまでに酵母細胞を含むいくつかの異なった細胞と組織由来のmRNAを単離するために使われています。 例えば、Candida tropicalisin 細胞培地や、Hansenula polymorpha 固体サンプル、Saccharomyces cerevisiaeの細胞培地及び固形サンプルから、mRNAが単離されています。
J. D. B. Faulkner and N. P. Minton. Rapid Small-Scale Isolation of mRNA from Whole Yeast Cells. BioTechniques 14(5):718?720, 1993. (Saccharomyces cerevisiaeからダイレクトにmRNAを抽出した例)
C. C. Tebbe, D. F. Wenderoth, W. Vahjen, K. Lübke and J. C. Munch. Direct Detection of Recombinant Gene Expression by Two Genetically Engineered Yeasts in Soil on the Transcriptional and Translational Levels. Appl.Environ.Microbiol. 61 (12):4296-4303 1995. (Hansenula polymorphaおよびSaccharomyces cerevisiaeinからダイレクトにmRNAを抽出した例)
Imanishi Y, Kawai T, Iwaguchi S, Suzuki T, Kamihara T, Yokoyama, K Nishimura K. Subtractive gene cloning using dynabeads oligo(dT)25 for elucidation of pseudohyphal formation in Candida tropicalis. Nippon Ishinkin Gakkai Zasshi. 2001;42(4):243?51 (Candida tropicalisからダイレクトにmRNAを抽出した例)
Two references where fungi total RNA is isolated first prior to mRNA isolation using mRNA Purification kit which might be useful P. Brook, P. Sim, and P. Broda. Isozyme Specific Polymerase Chain Reaction Analysis of Differential Gene Expression: A General Method Applied to Lignin Peroxidase Genes of Phanerochaete chrysosporium. BioTechnology 11:830?834 1993. P. Brod, P. R. J. Birch, P. R. Brook and P. F. G. Sims. PCR-Mediated Analysis of Lignocellulolytic Gene Transcription by Phanerochaete chrysosporium: Substrate-Dependent Differential Expression within Gene Families. Appl.Environ.Microbiol. 61(6):2358?2364, 1995