STEMCELL Technologies STEMdiff Human iPSC-Derived Retinal Pigment Epithelial Cells
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高品質で使いやすいHuman iPSC由来網膜色素上皮（RPE）細胞で網膜研究を始めましょう。本製品は高度に特性化された健常コントロールヒト人工多能性幹細胞（iPSC）株SCTi003-A（製品コード：ST-200-0511）またはSCTi004-A由来（製品コード：ST-200-0769）に由来する凍結保存RPE細胞です。
（ST-200-0912, ST-100-2150はSCTi003-A由来、ST-200-0913, ST-100-2151はSCTi004由来）
解凍後、これらのRPE細胞はSTEMdiff™-XF RPE Maturation Medium（製品コード：ST-100-1365）を用いて成熟させ、長期培養に維持することができます。5週間成熟させると、RPEに特徴的なマーカーが高発現し、色素沈着した多角形の形態、極性化、視細胞外節（POS; Photoreceptor Outer Segment）を貪食する機能など、機能的成熟を示すようになります。このRPE細胞は、無血清、動物成分不含のSTEMdiff™-ACF RPE Differentiation Kit（製品コード：ST-100-1367）を用いて製造されています。最適な生存と接着のためには、STEMdiff™-XF RPE Maturation MediumとSTEMdiff™-ACF RPE Plating Supplement（製品コード：ST-100-1364）を併用して細胞を融解し、播種してください。 この研究用製品は、学術用および商業用の両方で承認されています。血液サンプルは、Institutional Review Board（IRB）またはその他の規制当局が承認した同意書およびプロトコルを用いて倫理的に提供されます。ドナーの詳細および供給元細胞バンクの細胞品質評価については、このページのデータ図をご参照ください。
その他詳細はよくある質問 ～凍結iPS細胞～を参照ください。
2018/05/14 12:00の製品情報
本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。
製品の特長
由来iPS細胞対応表
| 由来iPS細胞株 | 商品コード | 梱包単位 |
|---|---|---|
| SCTi003-A（健常女性ドナー由来） | ST-200-0912 | 1x106細胞 |
| ST-100-2150 | 1x106細胞 x 3 vial | |
| SCTi004-A（健常男性ドナー由来） | ST-200-0913 | 1x106細胞 |
| ST-100-2151 | 1x106細胞 x 3 vial |
特長
- 高度に特性化された健常コントロールヒト人工多能性幹細胞（iPSC）株由来の分化した高品質のRPE細胞により、実験を迅速に開始可能
- 5週間で極性化した色素細胞の視細胞外節（POS）の貪食によって機能的に成熟
- STEMdiff™-XF RPE Maturation Mediumによる成熟、および長期的なRPE細胞の維持
- 網膜疾患のモデリング、治療法の発見、再生医療などの用途に柔軟に使用可能
データ紹介
ヒトiPSC由来網膜色素上皮（RPE）細胞はRPEの形態的特徴を示します
凍結保存したヒトiPSC由来網膜色素上皮（RPE）細胞を解凍し、150,000cells/cm²でCorning® Matrigel®コートプレートにプレーティングしました。RPE細胞は、STEMdiff™-ACF RPE Plating Supplementを添加したSTEMdiff™-XF RPE Maturation Mediumで7日間維持し、その後はSTEMdiff™-XF RPE Maturation Mediumのみで維持しました。細胞は37℃でインキュベートし、その後、明視野顕微鏡で各時点で分析しました。代表的な顕微鏡画像は、63日以上の培養後、RPE細胞が期待される形態を示すことを示しています。
ヒトiPSC由来網膜色素上皮（RPE）細胞は35日目に成熟し機能します
ヒトiPSC由来RPE細胞を解凍し、STEMdiff™-XF RPE Maturation Mediumで少なくとも35日間培養し、RPEの成熟を示しました。
(A）PMEL17、CRALBP、EZRIN、およびRPE65を発現する2つの異なるiPSC株由来のRPE細胞の割合をフローサイトメトリー解析により評価しました。データは平均値±SEMとして報告されています（n = 4）。
(B,C）成熟RPE細胞はCRALBPの高発現を示し、細胞境界におけるZO-1とBEST1の局在によって示されるように、広範なタイトジャンクションを示します。
(D,E）成熟RPE細胞は極性化し、EZRIN（立体投影）とRPE65のような視覚サイクルに必須なタンパク質を発現しています。これらのマーカーは蛍光顕微鏡で可視化されています。
ヒトiPSC由来網膜色素上皮細胞はRPEの主要な機能を示す
ヒトiPSC由来網膜色素上皮（RPE）細胞を、STEMdiff™-XF RPE成熟培地中で細胞培養インサート上で35日間培養しました。成熟RPE細胞からアピカル培地と基底培地を採取し、サンドイッチELISAを行って血管内皮増殖因子（VEGF）と色素上皮由来増殖因子（PEDF）の分泌量を定量しました。
(A）細胞挿入培養システムの断面模式図がセットアップを示しています。2つのiPSC株由来の成熟RPE細胞は、(B)VEGFを基底側に、(C)PEDFを先端側に高レベルで分泌し、正しい先端基底極性を示しました。 (D）成熟RPE細胞もまた、高い経上皮抵抗（TER）を持つ強力なバリアを形成しました。(E）さらに、成熟RPE細胞にFITC標識したウシ視細胞外分節（POS）を4～5時間与えたところ、効率的にウシPOSを内在化しました。データは平均値±SEMで示しました。
