STEMCELL Technologies ImmunoCult ImmunoCult Human B Cell Expansion Kit
- 研究用
ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kit(ST-100-0645)は、ヒトのB細胞を活性化、増殖させ、形質細胞へと成熟させる培地キットです。血清や、特殊な培養器具、煩雑なフィーダー細胞を使わずに培養し、わずか1週間以内に採取されるB細胞を、そのまま下流アプリケーションに使用可能です。
キットには、ImmunoCult™-XF B Cell Base Medium(ST-100-0646)とImmunoCult™-ACF Human B Cell Expansion Supplement(ST-10974)が含まれます(それぞれ単品でも販売)。
本品は、上流や下流の実験向けの各種製品とも組み合わせて使用できます。例えば、EasySep™細胞分離キットでpan-B細胞、メモリーB細胞、ナイーブB細胞などのB細胞サブセットを単離した後、すぐに本品で増殖することができます。
製品の特長
ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kitで、ヒトB細胞を効率よく増殖
- 血清、フィーダー細胞、特殊な培養プレートを使わずに、ヒトB細胞をin vitroで確実に増殖
- 無血清培地と、動物性成分不使用のサプリメントを採用
データ紹介
図1. ImmunoCult™-ACF Human B Cell Expansion SupplementによるヒトB細胞の増殖と成熟
EasySep™ Human Pan-B Cell Enrichment Kit(ST-19554)により、ヒト末梢血単核細胞(PBMC)(leukopak)から単離したB細胞を、 ImmunoCult™-ACF Human B Cell Expansion SupplementおよびImmunoCult™-XF B Cell Base Mediumとともに、24ウェル組織培養プレートに1 × 10^5細胞/ウェルで播種し、3〜4日ごとに継代した。(A)生存細胞の増殖倍率(n = 12ドナー)を、平均および95%信頼水準を表すバー(14 ± 1日目時点で38〜1190倍の範囲)とともに示した。(B)各時点のCD138とCD20の発現を、フローサイトメトリーで解析した(データは陽性の生存細胞頻度を示す; 平均 ± 1 SD)。観察された変化は、B細胞から形質細胞や形質芽細胞への成熟を示唆する。

図2. 培養ヒトB細胞の光学顕微鏡像
EasySep™ Human Pan-B Cell Enrichment KitでヒトPBMC(leukopak)から単離したB細胞を、24ウェル組織培養プレートに1 × 10^5細胞/ウェルで播種し、ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kitで培養した。播種後4日目に継代し、6日目に40倍で撮影した。
図3. ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kitで培養したヒトメモリーB細胞の増殖と生存
EasySep™ Human Memory B Cell Isolation KitでヒトPBMC(leukopak)から単離したメモリーB細胞を、48ウェル組織培養プレートに0.5 × 10^5細胞/ウェルで播種し、ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kitで培養した。細胞は2~4日ごとに継代し、各時点の生存細胞の増殖率(A)および細胞生存率(B)を算出した。データは、同じドナーの培養を3回実施した平均 ± 1 SDで表した。
図4. ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kitで培養したヒトナイーブB細胞の増殖と生存
EasySep™ Human Memory B Cell Isolation KitでヒトPBMC(leukopak)から単離したナイーブB細胞を、48ウェル組織培養プレートに0.5 × 10^5細胞/ウェルで播種し、ImmunoCult™ Human B Cell Expansion Kitで培養した。細胞は2~4日ごとに継代し、各時点の生存細胞の増殖率(A)および細胞生存率(B)を算出した。データは、同じドナーの培養を3回実施した平均 ± 1 SDで表した。
図5. さまざまな基礎培地(+ ImmunoCult™-ACF Human B Cell Expansion Supplement または 10% FBS)で培養したヒトPan-B細胞の増殖
EasySep™ Human Pan-B Cell Isolation KitでヒトPBMC(leukopak)から単離したPan-B細胞を、24ウェル組織培養プレートに1 x 10^5細胞/ウェルで播種した。培地はImmunoCult™-XF B Cell Base Medium + ImmunoCult™-ACF Human B Cell Expansion Supplement(10974)、または他の基礎培地 + ImmunoCult™-ACF Human B Cell Expansion Supplement または 10% ウシ胎仔血清(FBS)のいずれかを使用した。細胞は3~4日ごとに継代し、各時点における生存細胞の増殖倍率を算出した。データは、n = 3ドナー(各培養条件を3回実施)における平均値 + 1 SDを示す。
関連製品
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