STEMCELL Technologies ClonaCell ClonaCell-HY 各コンポーネント
- 研究用
ClonaCell™-HY Hybridoma Kitの構成品
ClonaCell™-HY Medium A(ST-03801)融合前の親ミエローマ細胞の増殖、そして選択後の安定したハイブリドーマクローンの増殖のために配合された血清含有液体培地です。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたハイブリドーマの産生に適すると報告されています。
ClonaCell™-HY Medium B(ST-03802)
融合前と融合プロセス中にリンパ球および親ミエローマ細胞を洗浄して血清を除去するために用いる無血清液体培地です。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたハイブリドーマの産生に適すると報告されています。
ClonaCell™-HY Medium C(ST-03803)
融合プロセス(PEGベースまたは電気融合)後、ヒポキサンチン・アミノプテリン・チミジン(HAT)選択の前に、ハイブリドーマの生存と回復を促進するために用いる血清含有液体培地です。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたハイブリドーマの産生に適すると報告されています。
ClonaCell™-HY Medium D(ST-03804)
血清と選択剤のヒポキサンチン・アミノプテリン・チミジン(HAT)を含む半固形メチルセルロースベースの培地です。リンパ球とミエローマ細胞を融合させた後、ハイブリドーマの選択とクローニングをワンステップで行うために用います。
個々のハイブリドーマクローンとその子孫はともに、半固形マトリックス中で局在化したまま増殖し各コロニーを形成します。これにより、液体培地中の選択で起こり得る、増殖がより速い細胞の過剰増殖による希少クローンの損失を防ぎ、単クローンのコロニー単離を容易にします。半固形培地内のハイブリドーマコロニーは手作業かロボットで容易に回収でき、液体増殖培地に分散させてスクリーニングおよび増殖できます。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたハイブリドーマの産生およびクローニングに適すると報告されています。
※ 半固形クローニングの利点:
・個々の細胞が粘性培地に懸濁され、物理的に離れた単離しやすいコロニーを形成
・限界希釈による選択およびクローニングと比べて、モノクローナル細胞株を短時間かつ少ないリソースで単離
・広範囲の増殖速度と生産性を持つ多様なクローンが、粘性培地中で別々にコロニーを形成
その結果、半固形培地で選択とクローニングを同時に行うと、バルク液体培養での選択と比べて、希少で高生産性のクローンを容易に単離できます。
ClonaCell™-HY Medium E(ST-03805)
ヒポキサンチン・アミノプテリン・チミジン(HAT)選択後のハイブリドーマ増殖用に最適化された、栄養豊富な血清含有液体培地です。ヒポキサンチンとチミジン(HT)を含み、選択過程で使用したアミノプテリンをハイブリドーマから除去するために用います。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製とモノクローナル抗体産生での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたハイブリドーマの産生、クローニングおよび増殖に適すると報告されています。
不安定なハイブリドーマ細胞株のサブクローニングと安定化に有効であることが証明されています。
ClonaCell™-HY PEG(ST-03806)
ミエローマ細胞とリンパ球の細胞融合を誘導してハイブリドーマを作製するのに適しています。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたハイブリドーマの産生、クローニングおよび増殖に適すると報告されています。
Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM)中のPEG 3350の50%(w/v)溶液として提供され、ゲンタマイシンおよびフェノールレッドを含有します。
その他のClonaCell™-HY関連培地
ClonaCell™-HY Medium D without HAT(ST-03810)HAT(ヒポキサンチン、アミノプテリン、チミジン)などの選択剤を含まない、半固形メチルセルロースベースの血清含有培地です。ハイブリドーマやミエローマの選択の代替法を可能にします。適切な選択剤を添加することで、ミエローマまたはハイブリドーマをワンステップで選択・クローニングできます。
個々のハイブリドーマクローンとその子孫はともに、半固形マトリックス中で局在化したまま増殖し各コロニーを形成します。これにより、液体培地中の選択で起こり得る、増殖がより速い細胞の過剰増殖による希少クローンの損失を防ぎ、単クローンのコロニー単離を容易にします。半固形培地内のハイブリドーマコロニーは、手作業またはロボットで容易に回収でき、液体増殖培地に分散させてスクリーニングおよび増殖できます。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたミエローマやハイブリドーマの産生およびクローニングに適すると報告されています。
半固形クローニングの利点は、上記(ST-03804、※)を参照。
ClonaCell™-HY Liquid HAT Selection Medium(ST-03831)
リンパ球とミエローマ細胞の融合後のハイブリドーマ選択に用いる、ヒポキサンチン・アミノプテリン・チミジン(HAT)を含む血清含有培地です。
マウスおよびラットのハイブリドーマ作製での使用を検証済みです。また、ヒト、マウス、ラット、ハムスターを含む様々な宿主動物由来のリンパ球を用いたミエローマやハイブリドーマの産生およびクローニングに適合すると報告されています。
ClonaCell™-HY AOF Expansion & Cloning Medium(ST-03835)
ヒポキサンチン・アミノプテリン・チミジン(HAT)選択後のハイブリドーマ増殖に最適化された、動物由来フリー(AOF)の無血清液体培地です。ヒポキサンチンとチミジン(HT)を含み、選択過程で使用したアミノプテリンをハイブリドーマから除去するために用います。ハイブリドーマの増殖を強力に促進し、シングルセルおよび限界希釈によるクローニング、血清含有培地から無血清培地への馴化、ならびにハイブリドーマ細胞株の生存と抗体生産性の安定化に有効です。
多くのハイブリドーマは、血清含有培地から馴化過程なしで本品に直接切り替えることができます。培地中に血清が存在しないため、血清由来免疫グロブリンからの干渉を受けずに、ハイブリドーマ由来抗体を検出および精製できます。
マウスおよびラットのハイブリドーマでの使用を検証済みで、マウスミエローマ(Sp2/0など)、ラットミエローマ(YB2/0など)、ヒトミエローマ(U266など)の増殖に適しています。
ClonaCell™-HY Medium A(ST-03801)およびClonaCell™-HY Medium E(ST-03805)の無血清の代替品として使用できます。培地とその構成要素の製造には、少なくとも二次レベルまで動物またはヒト由来原料が使用されていません。
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