• 免疫沈降法ステップの前に架橋していない抗体を取り除きましたが、まだゲルにバンドがあって、Dynabeadsから抗体が溶出している際の対処方法はどうしたら良いですか？
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  • もしゲルの泳動前、サンプルバッファに還元剤をお使いなら、サンプルバッファに還元剤を入れないで試してみてください。
  
  
  • DTTまたはβ-メルカプトエタノールのような還元剤は抗体内のジスルフィド架橋を壊し、軽鎖と重鎖の抗体を放出することになります。
  
  
  • 他の選択肢はタンパク質をpHを下げて溶出させることで、これはビーズに結合した抗体はそのまま残ります。
  
  

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