STEMCELL Technologies StemSpan StemSpan ACF

  • 研究用

ヒト造血系細胞の培養、増殖用に調製された無血清かつ動物由来成分フリー(ACF ※)な基礎培地です。リコンビナントタンパク質と合成成分のみを含み、ヒトおよび動物由来の成分を含みません。各StemSpanサプリメントを添加することで、ヒト臍帯血、動員末梢血、骨髄由来のCD34+細胞の増殖や、系列特異的な前駆細胞(赤血球系、骨髄系、巨核球)の増殖と分化にご利用いただけます。

2018/05/14 12:00の製品情報

ベリタス会員になると製品スペックを会員ページに登録(チェックリスト)が可能になり、販売価格を見ることができます。

本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

データ

CD34陽性細胞の増殖:
ヒト臍帯血由来CD34陽性細胞を、StemSpan CD34+ Expansion Supplement (ST-02691)を加えたStemSpan SFEM, StemSpan SFEM II, StemSpan ACF(※)にそれぞれ10,000 cells/mLで播種し7日間培養した後、細胞をカウントしフローサイトメトリーで解析した。CFU数は、培養後の細胞をMethoCult H4435に再播種し14日後に形成されたコロニーをカウントした。
TNC: total nucleated cells
*p<0.001, #p<0.05, paired t-test, n=6

StemSpan_CD34[1].jpg

※ACF (Animal Component-Free) の定義:

STEMCELL Technologies社の培地については、以下のように定義されています。

  • 完成品には、動物(ヒトを含む)の組織や体液、あるいは動物の組織や体液から単離または精製された成分は含まれていません。
  • 動物細胞株または発酵プロセスで生産されたものを含む、動物または非動物の組み換えタンパク質が含まれることがあります。
  • 動物由来の成分は、特に明記しない限り、製造の2次または3次レベルで原材料として使用されている可能性があります。

技術資料

よくある質問

ヒト末梢血から分離したCD34陽性細胞を好中球に分化培養させる方法はありますか?

CD34陽性細胞からの好中球分化に関しましては、STEMCELL Technologies社より下記の情報が得られています。造血幹細胞用無血清培地のStemSpan SFEMを利用した好中球分化の方法になります。

For inducing neutrophil differentiation from CD34+ cells one could recommend using StemSpan SFEM supplemented with StemSpan CC100 Cytokine Cocktail and adding G-CSF either immediately or upon replating after a few days. Cultures should be monitored closely for cell growth viability and phenotype as the outcome is dependent on many variables: cell purity, quality and density culture time refeeding schedules. The timing is important as it is easy to overgrow these cultures. Neutrophils are shortlived cells and cell yield or quality may suffer if culture conditions and timing are not right. Other cell types will also be produced specifically Macrophages and Erythroid cells (even in the absence of EPO). Some publications recommend a replating schedule with eventual switch to G-CSF only which is intended to promote selective outgrowth and maturation of Neutrophils only. It can take 14-16 days to achieve complete differentiation from CD34+ cells into Neutrophils.

JY, Kuan JY, Lonkar PS, Krause DS, Seidman MM, Peterson KR, Nielsen PE, Kole R, Glazer PM. Correction of a splice-site mutation in the beta-globin gene stimulated by triplex-forming peptide nucleic acids. Proc Natl Acad Sci U S A. 105:13514-9, 2008.
MPB CD34+ cells differentiated into neutrophils. For their neutrophil differentiation protocol see Supporting Information (under Cell Transfection)
Cells were plated in StemSpan SFEM + CC100 cytokine cocktail (100 ng/mL Flt-3L 100 ng/mL SCF, 20 ng/mL IL-3, 20 ng/mL IL-6) immediately following neucleofection. 48 hours after neucleofection culture media was switched to SFEM with 100 ng/mL Flt-3L, 50 ng/mL SCF, 5 ng/mL IL-3, 5 ng/mL GM-CSF and 30 ng/mL G-CSF for days 2-5 following nucleofection. Media was again switched to SFEM with 5 ng/mL IL-3 and 30 ng/mL G-CSF for days 6-9 following nucleofection and thereafter 30 ng/mL G-CSF in SFEM for up to 14 days following nucleofection.

Hino M et al. Thrombopoietin stimulates ex vivo expansion of mature neutrophils in the early stages of differentiation. Ann Hematol. 2003 Nov;82(11):671-6. Epub 2003 Oct 3.
This group cultured CD34+ cells purified from PB in basal medium (IMDM) supplemented with FBS and SCF, IL-3, TPOand G-CSF for the first 7 days. For the later phase of culture (the following 9 days), cells were cultured in IMDM with FBS and G-CSF alone. The same cytokine combination and plating schedule could be attempted using StemSpan in place of IMDM + FBS.

Tatsumi N et al. Ex vivo expansion of mature human neutrophils with normal functions from purified peripheral blood CD34+ haematopoietic progenitor cells. Br J Haematol. 2000 May;109(2):314-21.
PB CD34+ cells were cultured in RPMI-1640 medium supplemented with 10% FCS, SCF, IL-3, GM-CSF and G-CSF for 7 d and were further cultivated for another 7 d with G-CSF alone to achieve cultures with 95% functional neutrophils. The same cytokine combination and plating schedule could be attempted using StemSpan in place of RPMI + FBS.

Flavia Marturana* Nicholas E. Timmins* & Lars K. Nielsen. Short-term exposure of umbilical cord blood CD34+ cells to granulocyte–macrophage colony-stimulating factor early in culture improves ex vivo expansion of neutrophils. Cytotherapy 2011: 366-377. http://informahealthcare.com/doi/abs/10.3109/14653249.2010.518610

Adrian Schreiber et al. Membrane Proteinase 3 Expression in Patients with Wegener’s Granulomatosis and in Human Hematopoietic Stem Cell–Derived Neutrophils. JASN July 1    2005 vol. 16 no. 7 2216-2224.
http://jasn.asnjournals.org/content/16/7/2216.full

利用している培地製品および成長因子は下記のものになります。
StemSpan SFEM (ST-09600,ST-09650)
StemSpan CC100 (ST-02690)
Human G-CSF (ST-02615)

開く閉じる
StemSpan-ACFにはアルブミンが含まれますか?

StemSpan-ACFの組成はメーカーから非開示の情報ですので、アルブミンが含有されているかについてもご回答いたしかねます。

開く閉じる
StemSpan SFEMとStemSpan SFEM IIの違いは?

StemSpan SFEM IIはStemSpan SFEMをヒト用に改良した培地で、推奨アプリケーションは同じです。ヒト造血幹細胞の増殖効率が大幅に向上しています。組成の違いは非公開です。SFEM IIには、LDLなどの脂質源添加の必要がなく推奨もしていません。

開く閉じる

関連製品

製品についてのお問い合わせ

掲載製品の技術情報、在庫や価格など、各窓口にお気軽にご相談ください。

法規制アイコン
毒 毒物及び劇物取締法の「毒物」(法第2条別表第1)を含む製品です。
劇 毒物及び劇物取締法の「劇物」(法第2条別表第2)を含む製品です。
カ 「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」(通称カルタヘナ法)の使用規制対象となる製品です。 ご使用に際しては規制に即し適切にお取り扱いください。
労 労働安全衛生法の「名称等を表示すべき危険物及び有害物」(法第57条)、あるいは「名称等を通知すべき危険物及び有害物」(法第57条第2項)を含む製品です。
向 麻薬及び向精神薬取締法の「麻薬向精神薬原料」(法第2条の7、別表第4)を含む製品です。