STEMCELL Technologies IntestiCult IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse)

  • 研究用

マウス腸陰窩(intestinal crypt)から腸管オルガノイドを効率良く形成し、長期培養するための無血清培地です。腸管オルガノイドは腸管上皮と幹細胞のダイナミクスを研究するためのin vitro 器官培養系です。成体腸管上皮の全細胞タイプを含み、極性のある上皮の特徴を持ちます。またin vivo の腸を特徴づける、機能的な管腔とcrypt-villus(陰窩- 絨毛)構造を持ちます。本培地で培養された腸陰窩は迅速にオルガノイドを形成し、発生・機能解析・腸疾患モデル・幹細胞および再生医療研究などのアプリケーションにご利用いただけます。

2018/05/14 12:00の製品情報

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本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

  • 成体腸管上皮の特徴と組織を再現した、簡易なin vitro 培養系
  • 無血清でdefined な培地組成で、高い再現性を実現
  • 1週間以内で腸管オルガノイドを形成可能
  • シンプルなフォーマットと簡便なプロトコール

腸管オルガノイドのアプリケーション

  • 腸管幹細胞研究
  • 腸疾患
  • 成体幹細胞研究
  • 遺伝子治療のための基礎研究
  • 創薬スクリーニング

5日培養後のマウス腸管上皮オルガノイド

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Technical Tips:

詳細なプロトコールは、製品添付文書のほかTechnical Bulletinをご参照ください。

IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse) の完全培地に、1mM バルプロ酸(Valproic acid)および1μM CHIR99021を添加することで、マウス腸管オルガノイドの培養効率が向上する場合があります。
参考文献: Yin X, et al. Niche-independent high-purity cultures of Lgr5+ intestinal stem cells and their progeny. Nat Methods. 2014 Jan;11(1):106-12.

技術資料

製品関連文献

よくある質問

マウス用IntestiCultのオルガノイド作成効率が悪いのですが?

以下のマニュアルに従って操作を行ってください。 http://www.stemcell.com/media/files/techbulletin/TB28223-Intestinal_Epithelial_Organoid_Culture_with_IntestiCult_Organoid_Growth_Medium_(Mouse).pdf   継代に際してのおもなコツはこちらです。   ・オルガノイドの付着を防ぐため、GCDRであらかじめチップ表面を濡らしてから操作します。 ・細胞ペレットの吸引を回避するため、GCDRでインキュベーションして遠心したあとはデカンテーションでGCDRを除きます(GCDRが残っても、DMEMによる洗浄で除かれる)。 ・1回目の遠心(290 x g)で大小のフラグメント、シングルセルなど全てをペレットにし、2回目の遠心(200 x g)でデブリやシングルセルを上清に残して培養物(オルガノイド)をきれいにします。 ・オルガノイドの密度が低い場合split ratioを低くしても構いません(例:1:4 ~ 1:1)。 ・継代および凍結のステップにおいてオルガノイドのロスが見られるようなら、あらかじめmedium + 1% BSAで濡らしたチップを使用してください。  

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