STEMCELL Technologies IntestiCult IntestiCult Organoid Growth Medium (Human)

  • 研究用

ヒト腸陰窩 (intestinal crypts) に由来する腸オルガノイドを効率よく形成し、長期培養するための完全培地です。腸管オルガノイドは、腸上皮の研究に有用なin vitro器官培養系を提供します。オルガノイドは、成人腸上皮の既知の細胞種から構成された、極性のある上皮細胞層で囲まれた機能的内腔を有します。IntestiCult Organoid Growth Medium (Human) は、単離したヒト腸陰窩から迅速にオルガノイドを形成させる培地です。成熟した腸管オルガノイドは、生体内の腸陰窩と同様に、突出した芽のような構造を形成します。腸管オルガノイドは、腸管上皮の発生と機能の研究、腸疾患モデル、標的低分子スクリーニング、さらには成体幹細胞の特性や再生医療の研究など、さまざまなアプリケーションにご利用いただけます。

2018/05/14 12:00の製品情報

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本製品は研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

製品の特長

特長

  • 成体腸管上皮の特徴と組織を再現した、簡易な in vitro 培養系
  • サイトカインなどの添加が不要な完全培地で、結果の再現性が高い
  • ヒト腸陰窩から1週間以内で腸管オルガノイドを形成可能
  • シンプルなフォーマットと簡便なプロトコール

腸管オルガノイドのアプリケーション

  • 腸管幹細胞研究
  • 腸疾患モデル研究
  • 成体幹細胞研究
  • 遺伝子治療のための基礎研
  • 創薬スクリーニング

ST-06010のコンポーネント

  • IntestiCult OGM Human Component A, 50 mL
  • IntestiCult OGM Human Component B, 50 mL

※ 使用前にComponent AとComponent Bを等量混合します。混合後は、冷蔵(2 -8℃)で1週間保存可能です。
※ 他にCorning Matrigelなどが必要になります(詳細は製品添付文書を参照)。
※ 腸管オルガノイドの凍結保存には、CryoStor CS10が最適です。

データ例

初代腸菅オルガノイドから培養10-14日で完全に成熟

ヒト結腸生検サンプルから分離した初代オルガノイドをIntestiCult Organoid Growth Medium(Human)で増殖培養させた。(A)培養2日後、(B)6日後、(C)8日後、(D)10日後の腸管オルガノイドをそれぞれ画像化したもの。

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腸管上皮細胞のマーカーの発現

(A)DAPI、(B)EPCAM、(C)Ki67に対する免疫蛍光染色像。
(D)(A)~(C)のマージ画像。上皮層(EPCAM +)内で活発に増殖する(Ki67 +)腸管幹細胞を示している。

06010_fig2.jpg

ヒト腸管オルガノイドのフォルスコリン誘発性腫脹

ヒト腸管オルガノイドを(A)5 μMフォルスコリンまたは(B)DMSOで処置したオルガノイド面積を、処理後0分または120分に測定した。(C)フォルスコリン処理オルガノイドの面積は、DMSO処置オルガノイドにと比べて増加した(処理前:7.5 ± 0.8 %、処理後:33.5 ± 3.8 %)。

06010_fig3.jpg

技術資料

よくある質問

ヒト用IntestiCultで継代する際に、1個のドームあたり何個のクリプトが必要ですか?

継代の際は、(製品プロトコール C-14で)マトリゲルドームを壊したあと、1ドームあたり1000クリプトを加えてください。この中には成熟オルガノイド150-200個が含まれます。

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ヒト用IntestiCultの組成を教えてください。

ヒト用IntestiCultは、以下の2報の論文の組成が元になっています。   Long-term expansion of epithelial organoids from human colon, adenoma, adenocarcinoma and Barrett's epithelium; Sato T  Stange DE, Ferrante M, Vries RG, Van Es JH, Van den Brink S, Van Houdt WJ, Pronk A, Van Gorp J, Siersema PD, Clevers H. Gastroenterology. 2011;141(5):1762-72.   Isolation and in vitro expansion of human colonic stem cells; Jung P, Sato T, Merlos-Suárez A, Barriga FM, Iglesias M, Rossell D, Auer H, Gallardo M, Blasco MA, Sancho E, Clevers H, Batlle E. Nat Med. 2011;17(10):1225-7.

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ヒト用IntestiCultは、ヒト腸管オルガノイドをどのくらい継代することができますか?

少なくとも25継代できることを確認済みですが、半永久的に継代できると考えられます。

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