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StemSpanアプリケーション:ヒト造血幹細胞のCRISPR/Cas9ゲノム編集による血液疾患治療の研究

[ 2017-08-03 ]

2016年11月のNatureの論文で、ヒト造血幹細胞を用いてβサラセミアの原因遺伝子であるβグロビン遺伝子に対し、CRISPR/Cas9システムによる遺伝子編集を行った例が発表されました(DP Dever et al., 2016)。さらに、近年CRISPRシステムがPD-1およびCAR-T細胞によるがん免疫療法に応用されつつあるなど、ゲノム編集は現在最もホットな研究手法の一つになっています。

ヒト造血幹細胞を使用する際、CRISPRでゲノム編集された造血幹細胞・前駆細胞(HPSCs)を移植するため、編集されたHPSCsのex vivoでの拡大培養が必要です。STEMCELL Technologies社の無血清培地「StemSpan」は、優れたHPSCsの増殖能を示し、ex vivoでの拡大培養および分化に最適です。今回、「StemSpan」を使用してゲノム編集前後のHSPCsを増殖および分化させることにより、血液疾患の新しい細胞治療を提案した論文をご紹介いたします。

 

【StemSpanを使用したCRISPRゲノム編集に関する文献】

  • CRISPR/Cas9 β-globin gene targeting in human haematopoietic stem cells. DP Dever et al. Nature 2016 NOV.
  • Mast cells form antibody-dependent degranulatory synapse for dedicated secretion and defence. Joulia R et al. Nature communications 2015 JAN.
  • Attenuation of miR-126 activity expands HSC in vivo without exhaustion. Lechman ER et al. Cell stem cell 2012 DEC.
  • Selection-free genome editing of the sickle mutation in human adult hematopoietic stem/progenitor cells. DeWitt MA et al. Science Translational Medicine 2016 OCT.

 

【ゲノム編集を用いた研究概要と使用されたStemSpan製品】

DP Dever et al., 2016とDeWitt MA et al., 2016では、CRISPR/Cas9ゲノム編集前後の造血幹・前駆細胞(HPSCs)のex vivo増殖および分化に、STEMCELL Technologies社のStemSpan培地およびサプリメント(StemSpan CC110 Catalog #ST-02697; StemSpan Erythroid Expansion Supplement Catalog #ST-02692)を使用しています。

ゲノム編集プロトコル例

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【StemSpan製品概要】

 STEMCELL Technologies社は、造血幹細胞および造血前駆細胞の維持・増殖をサポートする血清代替物や無血清培地のリーディングサプライヤーとして、StemSpan SFEM/SFEM II(無血清培地)やStemSpan H3000(ヒト由来タンパク質または組み換えヒトタンパク質のみを含有する、ゼノフリー培地)、StemSpan ACF(動物由来成分不含培地)、サプリメント(リンパ系及び骨髄系の前駆細胞、lineage細胞へ分化、増殖用)を提供しています。

StemSpan 製品概要

 

【StemSpanのアプリケーション】

 

【StemSpanの特長】

  • 骨髄(BM)・臍帯血(CB)・末梢血(PB)由来の造血幹細胞の増殖
  • リンパ系及び骨髄系の前駆細胞とLineage細胞の分化
 
  • 無血清
  • 優れたHSPCsの増殖能
  • 長期培養可能
  • 目的に応じてサイトカインを添加可能

 

 

 

 

 

 

【データ例】

 

 

臍帯血由来CD34陽性細胞を、StemSpan Erythroid Expansion Supplementを加えたStemSpan SFEM IIで7日間および14日間培養した後、形成されたCD71+GlyA+細胞をフローサイトメトリーで解析した。

 

 

 

 

【関連資料】

 

【関連製品】

商品コード

商品名

梱包単位

ST-09600/ST-09650

StemSpan SFEM

100/500 mL

ST-09605/ST-09655

StemSpan SFEM II

100/500 mL

ST-09800/ST-09850

StemSpan H3000

100/500 mL

ST-09805/ST-09855

StemSpan ACF

100/500 mL

ST-02697

StemSpan CC110 

1 mL

 

 

 

 

 

 

 

 

 

【関連リンク】


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