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Lamininの勉強コーナー(E-learning:ES/iPS・肝・膵・神経疾患など)

[ 2018-08-15 ]

Laminin(ラミニン)は、in vitroで細胞とマトリックスの相互作用を生体内と同じ環境(ニッチ)を再現することで、細胞の機能改善に役立ちます。Lamininはほぼすべての細胞の成長・サポートに関わります。

Lamininを用いた、様々なアプリケーションをビデオでご紹介させていただきます。

 

GMP-compliant hESC-derived dopaminergic neurons

Dr. Agnete Kirkeby, Lund University, Lund, Sweden

06.Agnete Kirkeby from BioLamina on Vimeo.

Dr. Agnete Kirkebyは、臨床生産に適合する規模でhESC分化の0日目からダイレクトに神経分化するGMP準拠のプロトコールを紹介しています。
このアプローチで、ドーパミン作動性ニューロン前駆細胞(DA)の非常に高純度な集団(> 90%)を得られることだけでなく、移植可能な細胞の最終収量を>40倍も増加させることに成功しました(同じ数の細胞から始まる以前の胚様体プロトコールと比較した場合)。このプロトコールは、Cell Stem Cellに掲載されました。

 

Messenger RNA reprogramming-path to clinically relevant iPSCs

Dr. Luigi Warren, CEO, Cellular Reprogramming, Inc, USA

01.Luigi Warren from BioLamina on Vimeo.

この講演では、mRNAリプログラミング発達のプロセスの最初からレビューし、幾つかのチャレンジが述べられています。また、最新のテクノロジーに基づいて、ハイスループットで異種のゼノフリー、フィーダーフリーかつフットプリントフリーのiPSC derivationパイプラインの実装についてもプレゼンしています。

 

Efficient hepatocyte specification, maturation and organization

Dr. Kate Cameron, University of Edinburgh, UK

05.Kate Cameron from BioLamina on Vimeo.

ヒト組換えLaminin-521およびLaminin-111を用いて得られたヒトES細胞は、Matrigelで培養した細胞と比較して、肝細胞の分化、成熟、機能および表現型の安定化を大幅に改善することを示しています。Lamininで培養した細胞は小葉様構造を配置し、MRP1およびMRP2を発現し、胆汁流出が可能であり、肝細胞P450酵素代謝活性に有意な効果を示しています。GMP-ready肝細胞分化プロトコールは、Stem Cell Reportsに掲載されました。

 

Neural stem cells in health and disease

Dr. Anna Falk, Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden

02.Anna Falk from BioLamina on Vimeo.

Dr. Anna Falkは、患者のiPS細胞に由来する神経幹細胞およびニューロンを用いて、アルツハイマー病、自閉症およびダウン症候群のような疾患の細胞モデルを忠実に模倣する方法をプレゼンしています。
彼女は、in vitroモデルでいくつかの新規疾患特異的細胞表現型を発見しました。その多くは、神経前駆細胞の正しい機能に関わっています。

 

Clinically compliant hESC-derived RPE cells

Dr. Sonya Stenfelt, Karolinska Institute, Stockholm, Sweden

hESCを組換えヒトLaminin-521(完全にdefined・動物成分を含まない)で誘導・培養すると、分化した網膜色素上皮(RPE)細胞の形態、色素沈着、マーカー発現、単層の完全性、分極および食細胞作用は、体内と同じ特徴を示します。
著者らは、hESC-RPEおよび宿主網膜のin vivoイメージングを可能にする、萎縮モデル(a large-eyed geographic atrophy model)を確立しました。
hESC由来RPE細胞の臨床試験(clinical compliance)プロトコールは、Stem Cell Reportsに掲載されました。

 

Defined and xeno-free culture of high quality hESC and iPSC

Dr. Sergey Rodin, Karolinska Institute, Stockholm, Sweden

Laminin-521は、ゼノフリーかつdefinedな条件で、新たなhES細胞株の自己複製だけでなく、クローニング、誘導、さらにclonal derivationにもサポート可能です。またLaminin-521は、α6β1インテグリンとの相互作用を介して、PI3K / Akt経路のラミニンアイソフォーム特異的活性化および迅速な細胞遊走を誘導します。
ラミニン基質で拡大培養した後、全てのhESおよびヒト誘導多能性幹細胞株は、in vivo およびin vitroアッセイにおいて遺伝的に安定であり、多能性であることが確認されました。
このゼノフリーかつdefinedなhPSC長期培養プロトコールは、Nature Communicationsに掲載されました。

 

Efficient pancreatic islet maintenance and expansion

Dr. Anna Domogatskaya, Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden

生体内と同じ環境を再現可能なラミニンは、マウス膵島のin vitro培養(増殖、表現型の維持およびグルコース依存性インスリンのリリース)を可能にします。
選択された膵島特異的ラミニンで培養すると、膵島は以下のような効果を示しました:

  1. 異種細胞の組織化を伴う、扁平の接着性があるクラスターの広がり
  2. グルコース依存性インスリンのリリースにより、膵島の機能的能力の維持
  3. すべての内分泌系細胞は、特異的なマーカー発現および増殖能を維持

 

参考文献

  • Clonal culturing of human embryonic stem cells on laminin-521/E-cadherin matrix in defined and xeno-free environment. Rodin et al. Nat Commun. 2014
  • Monolayer culturing and cloning of human pluripotent stem cells on laminin-521 based matrices under xeno-free and chemically defined conditions. Rodin et al. Nature Protocols. 2014
  • a-5 Laminin Synthesized by Human Pluripotent Stem Cells Promotes Self-Renewal. Laperle et al. Stem Cell Reports, 2015
  • Higher-Density Culture in Human Embryonic Stem Cells Results in DNA Damage and Genome Instability. Jacobs et al. Stem Cell Reports, 2016
  • Laminin 521 stabilizes the pluripotency expression pattern of human embryonic stem cells initially derived on feeder cells. Albalushi et al. Stem Cell International, 2017

 

製品リスト

製品コード

製品名

梱包単位

BLA-LN111-02

Human recombinant laminin 111

100ug

BLA-LN111-03

Human recombinant laminin 111

1mg

BLA-LN211-02

Human recombinant laminin 211

100ug

BLA-LN211-03

Human recombinant laminin 211

1mg

BLA-LN221-02

Human recombinant laminin 221

100ug

BLA-LN221-03

Human recombinant laminin 221

1mg

BLA-LN332-0202

Human recombinant laminin 332

100ug

BLA-LN332-0302

Human recombinant laminin 332

1mg

BLA-LN411-02

Human recombinant laminin 411

100ug

BLA-LN411-03

Human recombinant laminin 411

1mg

BLA-LN421-02

Human recombinant laminin 421

100ug

BLA-LN421-03

Human recombinant laminin 421

1mg

BLA-LN511-02

Human recombinant laminin 511

100ug

BLA-LN511-03

Human recombinant laminin 511

1mg

BLA-LN521-02

Human recombinant laminin 521

100ug

BLA-LN521-05

Human recombinant laminin 521

500ug

BLA-LN521-175

Human recombinant laminin 521

17.5mg

BLA-LN521-25

Human recombinant laminin 521

2.5mg

BLA-KT202

LAMscreen

kit

 

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