HOME > 新製品 > ヒトES/iPS細胞:プライム型からナイーブ型に戻す!「NaïveCult」

ヒトES/iPS細胞:プライム型からナイーブ型に戻す!「NaïveCult」

[ 2017-11-16 ]

多能性幹細胞(PSC)のin vitroでの成長特性、すべての体細胞系統・生殖系列キメラを生じさせる可能性に基づいて、未分化なナイーブ型と分化進んだプライム型に分類されます。異なる多能性状態(ナイーブ型、プライム型)における幹細胞の特性プロパティに関する研究は、細胞分化機構の解明および他の基礎理論研究にとても重要です。

 ナイーブ型PSCは、着床前(pre-implantation)の状態に、プライム型より高く自己複製能および多分能を持っているため、初期胚発生の研究により多くの利点があります。ナイーブ型PSCの単細胞継代の容易さは、幹細胞の増殖・回復効率を劇的に改善させるだけではなく、遺伝子操作の実現可能性もより大きく増加させることができます。従って、ナイーブ型PSCは、遺伝子治療・器官再生などの再生医療および臨床治療に有用な細胞型と言われています。

 ナイーブ型とプライム型は、体内でそれぞれ異なる胚発生段階に対応するため、2つの型の細胞に基づいてモデルを構築することで、胚発生のシグナル経路と分子メカニズムを解析する事もできます。2つの型の比較と相互交換、発生段階的の疾患モデルは、薬物作用のメカニズム、遺伝子治療および新薬研究にも強力なツールとなり得ます。(ナイーブ型:ナイーブな、ナイーブ状態。プライム型:プライムド、プライム状態)

 STEMCELL Technologies社の「NaiveCultTM Media System」は、トランスジーンフリー(transgene-free)で、プライム型ヒト多能性幹細胞(hPSCs)をナイーブ型にリセットし、ナイーブ型関連遺伝子を高発現に維持する誘導(NaïveCult Induction Kit)・増殖(NaïveCult Expansion Medium)培地です

  キットのコンポーネントなど、詳しくはこちら>>

 

得られたナイーブ型hPSCs」

  • 安定なnaive-like hPSCsモフォロジー
  • ナイーブ型関連遺伝子の発現が高い!
  • 再度プライム型に戻して3胚葉への分化が可能

 

 

NaiveCultのアドバンテージ 

NAÏVE. ナイーブ型関連遺伝子を高発現するhPSCsを維持

TRANSGENE-FREE. 外因性因子フリーでナイーブ状態に復帰

ROBUST.  複数のhPSC株にわたり一貫した機能

DEFINED. 予めスクリーニングした高品質なコンポーネントを含有


 

 

「プライム型からナイーブ型hPSCsへの誘導スキーム」

NaiveCult プライム型からナイーブ型hPSCへの誘導スキーム

画像を拡大する>>

STEMCELL Technologies社の英語プロトコルはこちら>> 

 

  • NaïveCult Induction Kit(商品コード: ST-05580)は、英国ケンブリッジ大学のCambridge Stem Cell Instituteからのライセンスを受けて開発されました(Guo et al. 2017)。ステップワイズ・トランスジーンフリーなNaïveCult Induction Kitでリセットしたナイーブ型ヒト多能性幹細胞(hPSCs)は、ナイーブ型に特徴的な、均一なドーム状の、屈折エッジを有する明るい位相差像のコロニーを形成します。また、ナイーブ型hPSCsに関連する遺伝子発現プロファイルを維持します。(Takashima et al. 2014; Guo et al. 2016; Guo et al. 2017)。

※ 他にhistone deacetylase inhibitor(HDACi)(別売のSodium Butyrate(ST-72242)又は、Valproic Acid(Na Salt)(ST-72292))が必要になります。詳細はマニュアルをご覧ください。

 

  • NaiveCult Expansion Medium(商品コード: ST-05590)は、Cambridge Stem Cell InstituteのProf. Austin Smithによって開発された「t2iL + Gö」に基づいた組成です(Takashima et al. 2014; Guo et al. 2016)。STEMCELL Technologies社がライセンスを受け、遺伝子発現プロファイルを維持したまま細胞増殖を促進するよう組成を最適化して発売しました!

※ NaïveCult systemは、フィーダー細胞(不活性化したマウス胚線維芽細胞(iMEFs))との共培養系です。CF-1またはDR4を推奨します。詳細はマニュアルをご覧ください。

 


「得られたナイーブ型hPSCの結果」

  • 安定なnaïve-like hPSCsモフォロジー
  • ナイーブ型関連遺伝子の発現が高い!

得られたナイーブ型hPSCの結果

Fig 1. (A) NaiveCultで誘導・19回継代培養のたイメージ。(B) NaiveCultで誘導・20回継代培養したWLS-1C iPS細胞の遺伝子高発現プロファイル。
ES細胞のデータはこちら>>です。

 

  • 再度プライム型に戻して3胚葉への分化が可能

再度プライム型に戻して3胚葉への分化が可能

Fig. 2 NaïveCultで培養したナイーブ型hPSCsは、mTeSR1(ST-05850)で再プライミングされ、3つの体細胞系統すべてに分化した。

(A) STEMdiff Definitive Endoderm Kit(ST-05110)を用いて、分化させたヒトWLS-1C iPS細胞のフローサイトメーターの分画。>90%の割合でCXCR4+/SOX17+胚体内胚葉前駆細胞を示す。
(B) STEMdiff Mesodermal Induction Medium(ST-05220)を用いて、分化させたヒトWLS-1C iPS細胞のフローサイトメーターの分画。>80%の割合でBrachyury+/OCT4-中胚葉前駆細胞を示す。
(C)  STEMdiff SMADi Neural Induction Kit (ST-08581)を用いて、分化させたヒトWLS-1C iPS細胞神経前駆細胞の免疫染色イメージ(PAX6()、SOX1())。

 

 

【関連おすすめ製品】

 

プライム状態なhPSCを維持する培地:

  • mTeSR1 - アルブミン含有、プライム型hPSCの維持する培地
  • TeSR-E8 - ゼノフリー、プライム型hPSCを維持する培地

 

 

【関連文献】

  • Takashima Y et al.(2014)Cell 158(6): 1254–69.
  • Guo G et al.(2016)Stem Cell Reports 6(4): 437–46.
  • Guo G et al.(2017)Development 144(15): 2748–63. 920

 


【製品リスト】

商品コード

商品名

梱包単位

ST-05580

NaiveCult Induction Kit

kit

ST-05590

NaiveCult Expansion Medium Kit

kit

 

 

【関連リンク】