ViewRNA miRNA ISH Cell Assay Kit

マイクロRNA(miRNA)は細胞に局在する20 - 23ヌクレオチドから成るノンコーディングRNA(ncRNA)の一種で、遺伝子の発現制御に重要な役割を果たすと考えられています。さらに最近では、miRNAの異常発現と癌化や神経疾患の関連性についても注目されています。しかし、従来のin situハイブリダイゼーションでは検出感度や特異性に問題がありました。
InvitrogenTM ViewRNATM miRNA ISH Cell Assayは、24ウェルプレートまたは96ウェルプレートで培養した細胞に対して染色し蛍光顕微鏡で観察するin situハイブリダイゼーションアッセイで、miRNAおよびmRNAを1コピーから同時検出します。


   

■ 特長 ■
  ● 1コピーのmiRNA/mRNAを1ドットで表示
  ● 1種類のmiRNAと最大2種類のmRNAを同時染色
  ● 24ウェルプレート (*) または96ウェルプレートに対応
    (*) カバースリップを入れた24ウェルプレートを使用

■ プローブ・蛍光ラベルの種類 ■
  ● Type 1 : Fast Red(miRNA)
  ● Type 4 : Alexa 488(mRNA)
  ● Type 10 : Alexa 750 (*) (mRNA)
      * ViewRNA ISH Cell 740 Module (商品コード:TFA-QVC0200)もご用意下さい

■ ViewRNA miRNA ISH Cell Assay Kit ■
24ウェルプレートまたは96ウェルプレートで培養した細胞を染色するための試薬です。Type 1、Type 4のターゲットプローブと一緒に使用することで、miRNAおよびmRNAを各1種類染色することが可能です。1キットあたり24ウェルプレートの場合は24回分、96ウェルプレートの場合は144回分のアッセイができます。

■ ViewRNA ISH Cell 740 Module ■
ViewRNA Cell Assay Kitで3色の蛍光染色から、さらにType 10 (740 channel - Alexa 750) プローブを追加するための試薬キットです。2種類のmRNAを同時に検出することが可能になります。

■ ビデオマニュアル ■
・Preparing Poly-L-Lysine Coated Cover Slips / ポリリジンコートカバーグラスの準備
 

・Sample Preparation - Adherent Cells / 接着細胞サンプルの調製
 

・Sample Preparation - Suspension Cells / 浮遊細胞サンプルの調製
 

・EDC Crosslinking / EDC架橋
 

・Target Probe Hybridization / ターゲットプローブのハイブリ
 

・Mounting and Curing of Samples
 



本製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

細胞内のmiRNAも蛍光でドットで定量検出

ViewRNA miRNA ISH Cell Assayは、培養細胞中に発現するmiRNAを1コピーから検出することが可能になりました。HeLa細胞に存在する発現量が異なるmiRNA量を比較したところ、ほとんど発現しないDapBはFast Redによる赤色シグナルは検出されず、発現が高いLet-7aは非常に高く検出されます。右表は赤色の蛍光シグナルをグラフ化したもので、miRNAのコピー数と相関していることが分かります。

ViewRNA miRNA ISH Cell Assayにおけるプローブの特異性(3塩基違いの配列の例)

miR-548hまたはmiR-548i miRNAをトランスフェクトしたHeLa細胞に対して、miR-548hまたはmiR-548i プローブでin situハイブリダイゼーションを行ったところ、それぞれのプローブは交差せず配列特異的に検出されるのが分かります。

英語マニュアル

ViewRNA miRNA ISH Cell Assay 24-Well 英語マニュアル

ViewRNA miRNA ISH Cell Assay 96-Well 英語マニュアル

製品情報

製品コード 製品名 梱包単位 保存温度 該当法規 MSDS マニュアル・関連資料
日本語 英語 その他
TFA-QVC0200 ViewRNA ISH Cell Alexa 740 Module 24assay 冷凍(-20℃)  
TFA-QVCM0001 ViewRNA miRNA ISH Cell Assay Kit 24assay 室温/冷蔵/冷凍  

最新マニュアルはメーカーウェブサイトからダウンロードください

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