ヒトES/iPS細胞からの神経前駆細胞誘導、増殖 (STEMdiff Neural)

【 製 品 】
STEMdiff Neural Systemは、ヒトES/iPS細胞から神経前駆細胞を誘導し、増殖させ、凍結保存する各ステップに最適な製品を提供しています。神経前駆細胞のキャラクタリゼーションに適した抗体パネルもございます。

STEMdiff Neural System 製品群の概要(英語)


神経前駆細胞からニューロン、アストロサイトへの分化については、こちら>>

STEMdiff Neural Induction Medium (ST-05835, ST-05839)
STEMdiff SMADi Neural Induction Kit (ST-08581, ST-08582) NEW
ヒト多能性幹細胞(ES細胞・iPS細胞)を神経前駆細胞 (NPCs) に誘導するためのDefinedな無血清培地です。EB法、モノレイヤー法のどちらにも使用できます。
新発売の STEMdiff SMADi Neural Induction Kit は、従来からの STEMdiff Neural Induction Medium に STEMdiff SMADi Neural Induction Supplement を追加したキットです。Supplementの成分がTGF-β/BMP依存性の SMADシグナルを阻害することで、より効果的に神経誘導を行うことが出来ます。また、SOX1, Nestin, PAX6陽性のCNS-typeのNPCsをより多く誘導することが出来ます。

EB法で使用する場合、STEMdiff Neural Rosette Selection Reagent(下記)を併用することで、高純度のヒト神経前駆細胞を得ることができます。

STEMdiff Neural Rosette Selection Reagent (ST-05832)
STEMdiff Neural Induction Mediumで得られた接着性神経凝集体から、早期神経分化のサインとして観察されるNeural rosette clustersを選択的に解離する酵素フリーの試薬です。穏やかな機械的粉砕と併用することで神経前駆細胞 (NPCs) を高純度で回収でき、さらにシングルセルとして継代培養できます。

STEMdiff Neural Progenitor Medium (ST-05833)
神経前駆細胞を増殖するための無血清培地です。神経分化を最小限に抑えながら、1継代当たり3-5倍の増殖、および10回以上の継代が可能です。

STEMdiff Neural Progenitor Freezing Medium (ST-05838)
神経前駆細胞を凍結保存するためのDefinedな無血清培地です。DMSOを含んでいます。

STEMdiff Neural Progenitor Antibody Panel (ST-69001)
神経前駆細胞をキャラクタライズするための抗体パネルです。

【 特 長 】
STEMdiff Neural Induction Medium、およびSTEMdiff SMADi Neural Induction Kitの特長:
  ・ Defined, 無血清
  ・ 迅速で効率的な神経誘導
     - EB法では、16-19日で神経前駆細胞のシングルセル回収
     - モノレイヤー法では、6-9日で神経前駆細胞のシングルセル回収 詳しくはこちら>>
  ・ SMADi supplementの添加で、分化抵抗性の細胞株も効率よく神経誘導
  ・ SMADi supplementの添加で、CNS-type神経前駆細胞の純度が向上
  ・ mTeSR1, TeSR-E8で維持されたヒト多能性幹細胞で評価済み


STEMdiff Neural Induction Medium の使用方法 (英語)



【 文 献 】
STEMdiff Neural Induction Medium (ST-05835)
・ Fang D et al. (OCT 2016) Stem Cell Reports 7 4 678--692 Development and Dynamic Regulation of Mitochondrial Network in Human Midbrain Dopaminergic Neurons Differentiated from iPSCs
・ Tomov ML et al. (DEC 2016) Scientific Reports 6 1 37637 Distinct and Shared Determinants of Cardiomyocyte Contractility in Multi-Lineage Competent Ethnically Diverse Human iPSCs
・ Bagó et al. (FEB 2017) Science Translational Medicine 9 375 eaah6510 Tumor-homing cytotoxic human induced neural stem cells for cancer therapy
・ Niethamer TK et al. (MAR 2017) Stem Cell Reports 8 3 529--537 EPHRIN-B1 Mosaicism Drives Cell Segregation in Craniofrontonasal Syndrome hiPSC-Derived Neuroepithelial Cells
・ Xu X et al. (MAR 2017) Stem Cell Reports 8 3 619--633 Reversal of Phenotypic Abnormalities by CRISPR/Cas9-Mediated Gene Correction in Huntington Disease Patient-Derived Induced Pluripotent Stem Cells
・ Gabriel E et al. (JAN 2017) Cell stem cell Recent Zika Virus Isolates Induce Premature Differentiation of Neural Progenitors in Human Brain Organoids.
・ Leung A and Murphy GJ (JAN 2016) Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 1353 261--270 Multisystemic Disease Modeling of Liver-Derived Protein Folding Disorders Using Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs).
・ Zhang P-WW et al. (JAN 2016) Glia 64 1 63--75 Generation of GFAP::GFP astrocyte reporter lines from human adult fibroblast-derived iPS cells using zinc-finger nuclease technology.
・ Kim JJ et al. (DEC 2014) Genomics data 2 10 139--143 Molecular effect of ethanol during neural differentiation of human embryonic stem cells in vitro.


【 関連製品 】
NeuroFluor CDr3 (ST-01800)
プライマリーおよび多能性幹細胞から誘導された神経前駆細胞を選択的に生きたままラベルするための、膜透過性蛍光プローブです。マウス・ラット・ヒトの Fatty Acid Binding Protein 7 (FABP7) に特異的に結合します(Ex 579 nm、Em 604 nm)。ラベルした細胞は、蛍光イメージング・フローサイトメトリーでの定量解析・FACSでの分離に使用できます。

NeuroFluor NeuO (ST-01801) NEW
プライマリーおよび多能性幹細胞由来の神経細胞(マウス・ラット・ヒト)を選択的に生きたままラベルするための、膜透過性蛍光プローブです(Ex 478 nm、Em 557 nm)。ラベルした細胞は、蛍光イメージングで観察できます。


【 用 語 】
・ Neural Rosette
Neural Rosetteは、胚性幹細胞のin vitro分化培養で神経前駆細胞に発生したサインです。また、Neural Rosetteは、神経管の発生においてPax6、Sox1、Nestinのような神経前駆細胞に発現する多くのタンパク質を発現する円柱細胞の放射性配列です。Neural Rosetteは、多くの神経の分化プロトコルの最初のステップである神経誘導成功の形態学的サインとして広く認められています。

・ Neural progenitor cells (NPCs)
NPCsは、自己再生及びcentral nervous system (CNS)の分化した主な組織タイプ(神経細胞、星状細胞、オリゴデンドロサイト)を生む能力を有するものとしてキャラクタライゼーションされています。NPCsは、胚または成人哺乳類の脳から分離できますが、プライマリーヒトNPCsのin vitroでの増殖は、細胞入手の問題及びdoubling timeがゆっくりである為大変チャレンジングです。hPSCから誘導したNPCsは、in vitroでプライマリーヒトNPCsと同等の制限のないソースを意味します。

・ Flat cells
Flat cellsは、通常NPCsを含むneural rosette clusterの末端で見つかります。NPCsとのco-emergeは、スタートの多能性幹細胞の質に大きく依存します(質が高いとflat cellsは少なくなります)。文献では、flat cellsはneural-crest cellsとして示されました (Terskikh 2010)。NPCsの集団中のflat cellsの存在は、最終的に得られる分化させた細胞種の収率が減少する(基本的に希釈される)。それはSTEMdiff Neural Rosette Selection Reagentを使い培養物からこれらのflat cellsを除去することを強く推奨致します。



本製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

神経前駆細胞誘導と増殖のワークフロー(EB法、モノレイヤー法)

NeuroFluor NeuOで染色したヒトiPS由来ニューロン

(A) ヒトiPS由来神経前駆細胞(XCL-1) をSTEMdiff Neuron Maturation Mediumで18日間培養しNeuroFluor NeuO(緑色)で染色した。核はDAPI染色。
(B) 同サンプルを固定してβ-tubulin III(赤色)で染色した。いずれも倍率は20X。

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英語マニュアル

STEMdiff Neural Induction Mediumマニュアル

技術資料

STEMdiff Neural System ~ヒトES/iPS由来神経前駆細胞研究用~

【学会発表ポスター】NeuroFluor CDr3

【学会発表ポスター】STEMdiff Neural Induction Mediumによる神経前駆細胞誘導(EB法、モノレイヤー法)

【学会発表ポスター】STEMdiff Neural Systemによる神経前駆細胞の誘導、維持、および凍結保存

STEMCELL Technologies社 動画マニュアル ポータルサイト

製品情報

製品コード 製品名 梱包単位 保存温度 該当法規 MSDS マニュアル・関連資料
日本語 英語 その他
ST-01800 NeuroFluor CDr3 0.5mL 冷凍(-20℃)  
ST-01801 NeuroFluor NeuO 0.1mL 冷凍(-20℃)  
ST-05832 STEMdiff Neural Rosette Select Reagent 100mL 室温  
ST-05833 STEMdiff Neural Progenitor Medium kit 冷凍(-20℃)  
ST-05835 STEMdiff Neural Induction Medium 250mL 冷凍(-20℃)  
ST-05838 STEMdiff Neural Progenitor Freezing Medium 100mL 冷蔵(2-8℃)  
ST-05839 STEMdiff Neural Induction Medium 250mLX2 冷凍(-20℃)  
ST-08581 STEMdiff SMADi Neural Induction Kit kit 冷凍(-20℃)  
ST-08582 STEMdiff SMADi Neural Induction Kit, 2 pack kit 冷凍(-20℃)  
ST-69001 STEMdiff Human Neural Progenitor Antibody Panel 1Kit 冷蔵/冷凍  

最新マニュアルはメーカーウェブサイトからダウンロードください

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