EasySep ヒト制御性T細胞 (Treg) 分離

【概要】
新鮮あるいは凍結のヒト末梢血MNCや溶血させた血液から、制御性T細胞(Treg)を分離するための試薬です。
ポジティブ分離・ネガティブ分離を組み合わせて分離するキット、非常に高純度なTreg分離キット、ワンステップで抗体が結合していないTregを分離するキットなど、様々な種類から選択できます。

【EasySep 説明 (英語) 】


【特長】
 ● 高純度で迅速なシステム
 ● カラム不要で経済的
 ● 全血、バフィーコート、白血球アフェレーシスサンプルから直接細胞分離が可能
 ● ダウンストリームアプリケーションや、スタートサンプルに応じた最適なキットを選択可能

【製品】
≪ポジティブ分離・ネガティブ分離を組み合わせて分離するキット≫
 得られた細胞は、ダウンストリームアッセイに利用可能で、さらに細胞をセルソーターで分離する場合に、分離時間を短縮することが可能です。

 Complete Kit for Human CD4+CD25+ T Cells(商品コード:ST-15862)
  ● 全血からCD4+CD25high T細胞を、2つのシンプルなステップで迅速かつ簡便に分離します。
  ● RosetteSepで比重遠心によりCD4+ T細胞を回収(ネガティブ分離)した後、EasySep Human CD25 Positive Kitで細胞を分離します。
    ※ EasySep Human CD25 Positive Kitは単品での販売もございます(商品コード:ST-18231)。
  ● CD4+細胞からCD25+細胞のディプリーションにもご利用いただけます。
  ● CD4+CD25high 純度: 90 - 98%

 EasySep Human CD4+CD25+ T Cell Isolation Kit(商品コード:ST-18062)
  ● PBMCからCD4+CD25high T細胞を、カラム・洗浄なしで細胞を分離します。
  ● EasySep Neg Human CD4+ T Cell KitでCD4+ T細胞をネガティブ分離した後、EasySep Human CD25 Positive Kitで細胞を分離します。
  ● CD4+細胞からCD25+細胞のディプリーションにもご利用いただけます。
  ● CD4+CD25+FoxP3+ 純度; 61 - 83%

≪最も高純度なTreg細胞回収キット≫
 さらに高純度なTreg細胞を回収するために、T細胞集団からエフェクター細胞を除去するための表面マーカーであるCD49dや、FoxP3と逆相関な発現を示すCD127を組み合わせた分離キットです。
 得られた細胞は、セルソーターで更に分離する必要とせずにダウンストリームに直接使用可能です。

 Complete Kit for Human CD4+CD127lowCD25+ Regulatory T Cells(商品コード:ST-15861)
  ● 全血からダイレクトにFoxP3+ Treg細胞を高純度かつ高回収率で分離します。
  ● RosetteSepでCD4+CD127low T細胞を回収(ネガティブ分離)した後、EasySep Human CD25 Positive Kitで細胞を分離します。
  ● CD4+CD25+FoxP3+ 純度; 65 - 91%

 Complete Kit for Human CD4+CD127lowCD49d-CD25+ Regulatory T Cells (商品コード:ST-15864)
  ● 全血からダイレクトにFoxP3+ activated/memory Treg細胞を最高純度で分離します。
  ● RosetteSepでCD4+CD127lowCD49d- T細胞を回収(ネガティブ分離)した後、EasySep Human CD25 Positive Kitで細胞を分離します。
  ● CD4+CD25+FoxP3+ 純度; 67 - 93%

≪ネガティブ分離によるT reg細胞分離キット≫
 ポジティブ分離を行わずにネガティブ分離でTreg細胞を分離するキットです。
 PBMCからワンステップで抗体が付着していない(untouched)Treg細胞を1時間以内に分離します。

 EasySep Human CD4+CD127lowCD49d- Regulatory T Cells (商品コード:ST-19232)
  ● PBMCからワンステップで抗体が付着していないFoxP3+ T細胞を分離します。
  ● CD3+CD4+CD127lowCD49d-CD25+FoxP3+ 細胞 純度: 57.4 ? 87.4%.

  EasySep Human CD4+CD127low T Cells (商品コード:ST-19231)
  ● PBMCからワンステップで抗体が付着していないCD4+CD127low T細胞を分離します。
  ● 前濃縮により、セルソーターでの分離時間を短縮することが可能です。
  ● CD4+CD127low 細胞 純度: 86% - 97%

【CD4+CD25high T細胞分離キットの使用例】
  ・ 活性化および増殖1,2,3,4
  ・ 同種混合リンパ球反応(MLR)の抑制1,5
  ・ 樹状細胞との共培養2,5,6
  ・ 細胞移植4,7
  ・ RNAの抽出3,8
  ・ 遺伝子発現プロファイル8
  ・ RT-PCR解析5,8
  ・ クロマチン免疫沈降-DNAマイクロアレイ(ChIP-chip)8

【参考文献】
1. Wang X-N, Haniffa MA, Holtick U, et al. Regulatory T-Cell Suppression of CD8 T-Cell-Mediated Graft-Versus-Host Reaction Requires Their Presence During Priming. Transplantation. 88(2): 188-197.
2. Nguyen KD, Vanichsarn C, and Nadeau KC. Impaired IL-10?dependent Induction of Tolerogenic Dendritic Cells by CD4+CD25hiCD127lo/? Natural Regulatory T Cells in Human Allergic Asthma. J Respir And Crit Care Med. 2009; 180: 823-833.
3. Venken K, Hellings N, Broekmans T et al. Natural Naive CD4+CD25+CD127low Regulatory T Cell (Treg) Development and Function Are Disturbed in Multiple Sclerosis Patients: Recovery of Memory Treg Homeostasis during Disease Progression. J Immunol 2008; 180: 6411-6420.
4. Trzonkowski P, Bieniaszewska M, Juciska et al. First-in-man clinical results of the treatment of patients with graft versus host disease with human ex vivo expanded CD4+CD25+CD127- T regulatory cells. Clinical Immunology. 2009; 133(1): 22-26.
5. Shalev I, Liu H, Koscik C, et al. Targeted Deletion of fgl2 Leads to Impaired Regulatory T Cell Activity and Development of Autoimmune Glomerulonephritis. J Immunol 2008; 180: 249-260.
6. Muthuswamy R, Urban J, Lee J, Reinhart TA, Bartlett D, and Kalinski P. Ability of Mature Dendritic Cells to Interact with Regulatory T Cells Is Imprinted during Maturation. Cancer Res. 2008: 68(14): 5972-5978.
7. Richer MJ, Straka N, Fang D, Shanina I and Horwitz MS. Regulatory T-Cells Protect From Type 1 Diabetes After Induction by Coxsackie Virus Infection in the Context of Transforming Growth Factor. Diabetes. 2008; 57(5): 1302-1311.
8. Liu w, Putnam AL, Xu-yu Z, et al. CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4+ T reg cells. J Exp Med 2006; 203 (7): 1701-1711.



本製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。

CD4+CD127lowT Cell分離後のFACSデータ

関連製品

EasySep-器具

関連リンク

ヒト免疫学研究に役立つ情報サイト「Human Immunology Portal」

RoboSepによるEasySepの自動化

よくある質問

EasySepに関するFAQ

技術資料

【ビデオマニュアル】組織・凍結細胞からの細胞分離サンプル調製法

製品情報

製品コード 製品名 梱包単位 保存温度 該当法規 MSDS マニュアル・関連資料
日本語 英語 その他
ST-15861 Complete Kit for Human CD4+CD127lowCD25+ Regulatory T Cells 全血200mL用 冷蔵(2-8℃)  
ST-15862 Complete Kit for Human CD4+CD25+ T Cells 全血200mL用 冷蔵(2-8℃)  
ST-15864 Complete Kit for Human CD4+CD127lowCD49d-CD25+ Regulatory T Cells 全血200mL用 冷蔵(2-8℃)  
ST-17861 EasySep Human CD25 Depletion Kit 1X10^9cells用 冷蔵(2-8℃)  
ST-18062 EasySep Human CD4+CD25+ T Cell Isolation Kit 1x10^9cells用 冷蔵(2-8℃)  
ST-18231 EasySep Human CD25 Positive Kit 1x10^9cells用 冷蔵(2-8℃)  
ST-19231 EasySep Neg Human CD4+CD127low T Cell Kit 1x10^9cells用 冷蔵(2-8℃)  
ST-19232 EasySep Neg Human CD4+CD127lowCD49d-Regulatory T Cell Kit 2x10^9cells用 冷蔵(2-8℃)  

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